...某些蛋白质。 最近,从酵母双杂交系统衍生出一种新的方法,称为“反向双杂交”,主要用于鉴定可以干扰蛋白质间相互作用的化合物和多肽。与传统方式不同,这种方法可以用于开发在体内具有活性的药物。此外,酵母双杂交系统的作用已经扩展至对蛋白质的鉴定,...
...了解和选择。总的说来核酸的分离与纯化是在溶解细胞的基础上,利用苯酚等有机溶剂抽提(核酸溶于缓冲液,即水相),分离,纯化;乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀,收获。溶解细胞的方法因标本不同而不同,有用SDS加NaOH,有用蛋白酶,有的用超声波破碎等方法...
...大幅度降低杂交体的Tm值。第三,一次可大量合成寡核苷酸探针,使得这种探针价格低廉,与克隆探针一样,寡核苷酸探针能够用酶学或化学方法修饰以进行非放射性标记物的标记。最常用的寡核苷酸探针长18—40个硷基,目前的合成可有效地合成至少50个碱基的探针。...
...达到分离混合物、“去粗取精”的目的。四川大学华西药学院的侯世祥教授对含不同组分的中药复方进行了吸附纯化工艺和特性的研究,以探索树脂纯化技术在中药复方中应用的可行性与规律。 ◆可行性与规律 侯世祥介绍,在使用同一树脂型号(LD605)分离、...
...信号转导研究中具有独特的意义。根据核转录因子可与一些特定的核甘酸序列结合的特点,将其特定的核苷序列标记上同位素,来鉴定信号转导中的核转录因子。核转录因子具有一些特征性的结构域,即亮氨酸拉链(lucine zipper)、锌指结构(zinc ...
...核内。在这种情况下,寡核苷酸探针和短的PCR标记探针(80~150bp)具有较大的优越性。在选用探针时经常会受到可利用探针种类的限制。如在建立DNA文库时,手头没有筛选特定基因的克隆探针,这时就可用寡核苷酸探针来代替。但必须首先纯化该基因的...
...合成互补DNA,化学修饰过的dUTP同时掺入到标记的DNA探针中。杂交后用碱性磷酸酶标记的抗地高辛单抗与标记探针DNA中的Dig-dUTP结合,加入显色底物,在碱性磷酸酶作用下,转变成深棕色或蓝色的化合物。1.标记 本试剂盒采用随机引物标记...
...胶体金制备完毕后须经电镜下质量鉴定才能应用。一、胶体金颗粒直径测定用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察,主要观察金颗粒的大小,符合不符合所需要的颗粒直径,金颗粒...
...信号转导的结果是细胞核内一些转录因子同DNA上某些特定的序列结合,调节转录活性和基因的表达水平。因而分离鉴定细胞内核转录因子在信号转导研究中具有独特的意义。根据核转录因子可与一些特定的核甘酸序列结合的特点,将其特定的核苷序列标记上同位素,...
...取得良好的效果,而且无骨髓抑制等不良反应,可长期应用,显示出在抗肿瘤方面的良好发展前景。但在多糖类化合物的提取、纯化等方面尚不尽如人意,稳定性较差,还需要继续深入研究。...
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