英文名:Genomic Library是指将某生物的全部 基因组 DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上形成的集合。可分为核 基因组文库 、 叶绿体 基因组文库及 线粒体基因 组文库。 用 限制性内切酶 切割 细胞 的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到 细菌 中去,让 宿主 菌长成克隆。这样,...
运载体 是 基因工程 中将 DNA 片段(常为目的 基因 )转移至受 体细胞 的运载工具。运载体包含或本身就是是特殊的DNA片段,进入活 细胞 后有些运载体甚至能 自我复制 ,运载体的 基因组 即便常不在宿 主细胞 的基因组内, 仍然可以得到 表达 。通过将外源DNA插入载体DNA并导入到活细胞中, 就可以在活细胞中表达外源DNA,而进一步研究加载的DNA片...
... ,并 转录 表达出与该外源性DNA相应的 信使RNA 或 蛋白质 。 DNA重组技术 的主要步骤是: ① 选择并分离能携带外源性 DNA的载体。常用的DNA载体有 细菌 质粒 ( 染色体 外DNA),或 噬菌体 DNA,如 大肠杆菌 质粒CoLEI及pBR322;λ噬菌体及M13噬菌体DNA等,它们都能插入(或整合)一定长度的外源性DNA片段,并能在寄主细...
第四军医大学西京医院消化病研究所日前用噬菌体环7肽库成功筛选到能特异性结合胃癌耐药细胞株的短肽,为肿瘤治疗或药物靶向治疗奠定了基础。 胃癌化疗失败的主要原因之一是肿瘤在化疗中出现多药耐药现象。胃癌细胞在化疗药物长期持续作用下,不仅膜表面原有的某些分子发生高表达,而且出现许多未知新分子,这些变化均与耐药密切相关。如何克隆这些未知的分子,阐明其在多药耐药发生中的...
...的微量、混杂的目的基因易于 纯化 ,得以增量,便于分析。 外来基因引起 细胞 生物性状改变的过程叫转化(transformation),以 噬菌体 把 外源基因 导入 细菌 的过程叫转染(transfection)。利用载体(噬菌体或 病毒 )把遗传物质从一种 宿主 传给另一种宿主的过程叫转导(transduction)。一个或一组基因从一处转移到 基因组 ...
...要分析研究的微量、混杂的目的基因易于纯化,得以增量,便于分析。 外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化(transformation),以噬菌体把外源基因导入细菌的过程叫转染(transfection)。利用载体(噬菌体或病毒)把遗传物质从一种宿主传给另一种宿主的过程叫转导(transduction)。一个或一组基因从一处转移到基因组另一处的过程叫转位(t...
...要分析研究的微量、混杂的目的基因易于纯化,得以增量,便于分析。 外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化(transformation),以噬菌体把外源基因导入细菌的过程叫转染(transfection)。利用载体(噬菌体或病毒)把遗传物质从一种宿主传给另一种宿主的过程叫转导(transduction)。一个或一组基因从一处转移到基因组另一处的过程叫转位(t...
...要分析研究的微量、混杂的目的基因易于纯化,得以增量,便于分析。 外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化(transformation),以噬菌体把外源基因导入细菌的过程叫转染(transfection)。利用载体(噬菌体或病毒)把遗传物质从一种宿主传给另一种宿主的过程叫转导(transduction)。一个或一组基因从一处转移到基因组另一处的过程叫转位(t...
以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆,在理论上是很简捷的,即用一种限制酶切割质粒DNA,然后在体外与外源,DNA(如干扰素基因,生长激素基因)相连接,再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌,以鉴定重组DNA。 通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等,噬菌载体有M13噬菌体载体等。 图24-1 质粒载体的定向克隆 一、质粒或噬菌体载体与外源D...
...序测定前,需要用不同限制酶消化等测DNA,使其降成小片段,分别克隆到pUC1,18pUCl18,pUC19,M13mp18,M13mp19等载体中,分别测定各小片段的顺序,由于不同限制酶产生的片段之间有交错重叠顺序,根据片段间和末端重叠序列,用计算机软件如Mac Vector TM5.0分析DNA,Assemblylign TM排列出各片段的位置,进而排出D...
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