...mol/l NaHCO3 –Na2CO3 PH9.0) 稀释使每毫升内含蛋白10mg,缓冲液为总量的10%,降温至4℃,加入异硫氰酸盐荧光素,(蛋白:荧光素=50~80mg:1mg),在0~4℃下电磁搅拌12~14h。然后用半饱和和硫酸铵将标记...
...才能发生。2. 光变态反应少数人单受日光(或人工紫外线)照射,或同时有已知外源光敏剂存在时,可能发生日光荨麻疹或接触性光过敏性皮炎。此类光敏反应与免疫反应有密切关系,已知外源光敏剂主要有卤化水杨酰苯胺、氯丙嗪和六氯酚、血卟啉类及叶绿素类。引起...
...在温和的条件下,TNBS将核酸的胞嘧啶转化为N-甲氧基-5,6-二氢嘧啶-6-磺酸盐衍生物,对胞嘧啶残基进行磺化修饰制成磺化半抗原探针。此法十分简便,也可用于蛋白质的标记。标记方法:取变性单链的DNA5μg,溶于0.02mol/L硼酸钠...
...图7-1)。这是首例用细胞杂交法进行的基因定位。由此可见,研究基因定位时,由于有杂种细胞这一工具,只需要集中精力于某一条染色体上,就可找到某一基因座位。7-1 体细胞杂交基因定位示意图2.克隆嵌板法(clone panel method)是...
...图7-1)。这是首例用细胞杂交法进行的基因定位。由此可见,研究基因定位时,由于有杂种细胞这一工具,只需要集中精力于某一条染色体上,就可找到某一基因座位。7-1 体细胞杂交基因定位示意图2.克隆嵌板法(clone panel method)是...
...(RNa Dot Blot)(1)膜的处理:同DNA的打点法。(2)RNA变性:将提取的RNA与50μl 20×SSC/甲醛(30μl20×SSC加20μl甲醛)混合,65℃水浴15min。(3)点样:同DNA的打点法。(4)固定:同DNA...
...常用的探针标记法是缺口平移法(nicktranslation),其原理如图13-1。首先用适当浓度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探针DNA双链上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,...
...载体对抗DNP抗体产生的影响.他们发现,只有当初次与再次免疫时,半抗原需要在相同载体上才能产生半抗原抗体,称此为载体效应(表10-4)。证明载体不是单纯起运载半抗原的作用,而是具有载体特异性。因此提出一个完全抗原分子,必须具有载体决定簇和...
...应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用3H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,...
...3次;6.2.5倍体积乙醇沉淀DNA7.-70℃放置2~4h8.9000×g离心1h9.沉淀物用70%乙醇洗1次10.干燥,TE(pH7.2)溶解。表18-6 TE9 DNA提取液的制备500mmol/LTris20mmol/LEDTA10...
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