图16-9 DNA聚合酶的作用 1957年,Arthur kornberg首次在大肠杆菌中发现DNA聚合酶Ⅰ,(DNa polymerase Ⅰ,简写DNA polⅠ)后来又相继发现了DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ。(DNa polymerase Ⅱ,Ⅲ,简写DNA polⅡ,DNA polⅢ)实验证明大肠杆菌中DNA复制的主要过程靠DNa polⅢ起作用,...
DNA重组技术 (DNA recombinant technology),将不同来源的 DNA 片段共价整合到有复制功能的DNA中去的技术。又称 分子克隆 。该 重组 的 DNA 分子 可在寄主 细胞 中复制、 扩增 ,并 转录 表达出与该外源性DNA相应的 信使RNA 或 蛋白质 。 DNA重组技术 的主要步骤是: ① 选择并分离能携带外源性 DNA的载体...
DNA 复制的研究最初是在 原核生物 中进行的,有些原核生物的DNA复制已经搞得很清楚。 真核生物 比原核生物复杂得多,但DNA复制的基本过程还是相似的。在这里我们主要讨论一些重要的区别。 图16-16 端粒酶催化端区TG链的合成 1.与原核生物不同,真核生物DNA复制有许多起始点,例如 酵母 S.cerevisiae的17号 染色体 约有400个起始点,因...
真核rDNA序列的基因片段包含18S,5.8S和28S束,形成一个串联重复集群;NTS、非转录间隔、ETS、外部转录间隔、ITS、内转录间隔1和2,从5'末端编号。 核糖体DNA (Ribosomal DNA ,rDNA)是一种DNA 序列 ,该序列用于 rRNA 编码。 核糖体 是 蛋白质 和rRNA 分子 的组合, 翻译 mRNA分子以产生蛋白质的组件。...
...大压力的钢壁容器,即所谓的“弹”,其中有一可以通电的金属样品皿,放入一定量样品并且充以氧气。此“弹”放于四周有定量水的圆筒内,水与外界隔热。测定时通以电流,因有氧,遇火花样品完全燃烧,释放热量。读出水的温度变化后即可计算此样品所放出的热量。此为精确的直接测定法,但设备与操作均很繁复,应用不便。通常应用是从食物成份表计算食物内糖类、脂肪与 蛋白质 的含量,然后...
(一)DNA的酶切与连接 (1)酶切反应 同质粒DNA的鉴定,只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切,则成比例增加。 (2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀,-20℃2h以上。 (3)15000rpm离心15min,弃上清。 (4)加入75%乙醇洗涤2次,离心弃上清,真空抽干。 (5)加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
长末端重复序列 (LTR): 反转录病毒 的 基因组 的两端各有一个长末端重复序列(5'—LTR和3'—LTR),不编码 蛋白质 ,但含有 启动子 , 增强子 等调控元件, 病毒基因 给的LTP事例到 细胞 原癌基因 邻近处,使这些原癌基因在LTP强启动子和增强子的作用下被激活,将正常细胞转化为肉癌细胞。 长末端重复序列(long terminal repe...
(一) DNA 的 二级结构 双 螺旋结构 模型(double helixmodel) 1953年,Watson和Crick提出了著名的DNA 分子 的双螺旋结构模型,揭示了 遗传信息 是如何储存在DNA分子中,以及遗传性状何以在世代间得以保持。这是 生物学 发展的重大里程碑。 在DNA双螺旋结构模型建立之前,早在1868年,Miescher已经从 脓细胞...
新华社伦敦10月6日电,在发现脱氧核糖核酸(DNA)的双螺旋结构中作出突出贡献的诺贝尔奖得主、英国科学家莫里斯·威尔金斯5日在伦敦的一家医院去世,享年87岁。 1962年,威尔金斯与英国科学家弗兰西斯·克里克、美国科学家詹姆斯·沃森分享了诺贝尔 生理学 或医学奖。后两位科学家因为1953年首 先在《自然》杂志上发表文章、提出DNA的双螺旋结构模型而享誉世界,...
DNA变性是指双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,形成单链无规则线团,因而发生性质改变(如粘度下降,沉降速度增加,浮力上升,紫外吸收增加等),称为DNA变性。加热、改变DNA溶液的pH、或受有机溶剂(如乙醇、尿素、甲酰胺及丙酰胺等)等理化因素的影响,均可使DNA变性。 通常,可利用DNA变性后波长260nm处紫外吸收的变化追踪变性过程。因为DNA在260nm处有...
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