...快速、方便、廉价和检测批量化。 (4)PCR PCR将标本数目有限的目标DNA或RNA序列成百万倍放大,使敏感性大大提高。本法对实验室的要求较严格,您千万不要相信一些打着PCR的招牌行骗的门诊部。 ...
...℃的半衰期从Taq DNA聚合酶的5~6min提高到20min,同时该酶片段也对两个或更多模板位点的扩增反应即复合PCR(Multiplex PCR)更为有利。VentTMDNA多聚酶:是美国New England Biolabs公司从...
...英国的研究者称,干细胞移植后进行定量的反转录多聚酶链反应(RT-PCR)有助于慢性髓细胞性的进一步治疗。 伦敦Hammersmith 医院的Eduardo Olaverria 及其同事解释说:“RT-PCR已经广泛地应用于异基因干细胞移植...
...不对称PCR的基本原理是采用不等量的一对引物产生大量的单链DNA(ss-DNA)。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物;其最佳比例一般为1:50~1:100,关键是限制引物的绝对量。限制性引物太多太少,均不利于制备ss-DNA。也...
...诊断并对缺失定位(图13-9),在进行产前诊断时,一般可先通过检测家系中有关成员,即确定先证者的缺失区,然后有针对性地作PCR扩增,包括缺失部分的两端,以判断胎儿或有关患儿是否也获得了相同的基因缺失,但非缺失型不能用此法查出。...
...本病预后不佳且缺乏有效疗法,故应注重预防,提倡优生,进行婚前和产前检查。目前采用聚合酶链反应(PCR)和寡核苷酸探针(ASO)方法,或采用PCR和限制性内切切酶片段长度多态性(RFLP)方法,在妊娠早期即可作产前诊断,防止纯合子患儿的出生...
...在实际工作中常采用琼脂糖凝胶电泳。一般情况下先在电泳缓冲液或凝胶中加1%溴化乙锭(EB)(每100ml加100μl),然后将已经制备好的1%~2%琼脂糖凝胶(用电泳缓冲液配制)放入电泳槽内,加入待测样品10μl,同时用分子量标准品作标记。...
...近端0.5cm段;②置入0.4ml溶液2中(1.5ml管);③按程序A5~7步进行,用50μl体系作PCR。(5)血细胞RNA用焦碳酸二乙酯(DEP)抑制RNase,NP-40溶胞但不溶核。①用聚蔗糖-泛影葡胺或其它方法分离单核细胞;②置2...
...reamplification)或同时在引物扩增序列内部选择一寡核苷酸作探针,对PCR扩增产物进行southernblt检测,则可使敏感性增加10倍~100倍,可检出难以培养的球形Hp。2 在Hp流行病学研究中的应用因为PCR检测Hp的敏感性高、特异性强、检查快速;...
...近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进,重组DNA操作技术包括的范围不断扩大,DNA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。DNA克隆技术在动脉粥样硬化等疾病的病因...
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