...荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原...
...LP-PCR(Labelled Primers PCR)是利用同位素、荧光素等对PCR引物5’端进行标记,据此检测目的基因的存在与否,与常规PCR相比更为直观,省去了限制性内切酶酶切及分子杂交等繁琐步骤,而且一次可以同时分析多种基因成分,...
...根据具体情况采取不同的方法将标记蛋白质(或多肽)与未反应的游离放射性碘及受损伤的标记物分开,常用的方法有凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析、各种电泳法等。(二)乳过氧化物酶法(LPO)本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点...
...小分子物质旋转快,其偏振荧光弱。利用这一现象建立了荧光偏振免疫测定(floutescencepolarizationimmunoassay,FPIA),用于小分子物质特别是药物的测定。FPIA的试剂为荧光素标记的药物和抗药物的抗体,模式为均相...
...F(荧光素)和P(抗体蛋白)的克分子比值反映荧光抗体的特异性染色质量,一般要求F/P的克分子比值为1~2。过高时,非特异性染色增强;过低时,荧光很弱,降低敏感性。1.蛋白质定量 测定荧光抗体的蛋白质mg/ml量。2.结合荧光素定量 先制作...
...接种于含有荧光素标记的志贺氏菌免疫血清液体培养基中,37℃培养4~8小时。如标本中有相应型别的痢疾杆菌,繁殖后与荧光素抗体凝集成小菌球,在低倍或高倍荧光显微镜下易于检出。方法简便、快速,有一定的特异性。2.协同凝集试验:用志贺氏菌的lgG...
...显微镜问世后,Coon于1942年首先应用荧光素标记抗体检查肺炎球菌,为荧光抗体技术的发展奠定了基础。1961年Dixon开始在肾脏疾病中应用,对肾脏的免疫病理研究起了重要的推动应用,并逐渐成为在肾脏疾病的病理诊断中不可缺少的重要环节 。主要...
...观察。所应用的免疫细胞化学技术包括免疫荧光、免疫酶标及免疫电镜,兹分述如下:(一)免疫荧光细胞化学技术的应用自1938年超高压汞灯荧光显微镜问世后,Coon于1942年首先应用荧光素标记抗体检查肺炎球菌,为荧光抗体技术的发展奠定了基础。...
...FITC的异硫氰酸基在水溶液中与免疫球蛋白的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键,成为标记荧光免疫球蛋白,即荧光抗体。反应式如下(图3-6):一个Ig分子上最多能 标记15~20个FITC分子。图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱图3-6 抗体的...
...角膜、结膜上皮损伤或有溃疡时,可被荧光素染色,方法是点无菌的1%荧光素液于结膜囊内,然后用生理盐水冲洗,亦可用玻璃棒蘸少量药液于结膜囊内,进行观察。此时可见角膜、结膜破损处有嫩绿色着色,上皮完整处不染色。如有角膜瘘,点荧光素后作轻压眼球,...
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