...40℃恒温水浴中振荡浸取6小时。过滤后，滤渣再加5毫升无水乙醇同等条件下再提取6小时，过滤，滤液合并，定容25毫升为测试液。此外，他们又以黄嘌呤和鲁米诺分别用pH值10.2、浓度为50毫摩尔/升的碳酸盐缓冲液配成0.2毫摩尔/升的溶液，应用...
...（1）用4%多聚甲醛（在0.05mol/l 磷酸缓冲液中，pH7.2）在原位固定（4℃）1h。（2）用0.05mol/l PBS充分洗涤后，用HRP标记的抗体血清作用18h，再用PBS充分洗涤。（3）2%戊二醛固定1h，再水洗。（4）...
...ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sephadex G-50除去游离荧光素。AMC呈黄色结晶固体，最大吸收波长354nm,最大荧光波长430nm。...
...缓冲液（pH8.6）中，加入TNBS5μg溶解，在室温中反应1h。移入冰浴中，加入无水乙醇和70%乙醇各洗1次，晾干，用50μl消毒双蒸水溶解，分装，-20℃保存备用。...
...×SSC和0.5%SDS溶液的盘中,室温下漂洗5min,再将滤膜移入2×SSC和0.1% SDS中,室温下洗涤15分钟(轻轻摇动),然后将滤膜移入0.1%×SSC和0.5%×SDS溶液中,68℃轻轻摇动保温2h，更换缓冲液后继续保温30...
...在PAP法中可代替桥抗体。1．SPA—HRP用于间接法的操作步骤（1）切片经脱蜡后用0.5%H2O2—纯甲醇液处理5min以抑制内源性过氧化物酶活性。（2）用Tris盐酸缓冲液（0.05mol/l pH7.6）洗2次，每次3min。（3）以...
...DNA片段，连接缓冲液及T4连接酶适量至总体积为20μl，在12～14℃反应12～16h。（8）连接反应液可置-20℃保存，供转化用。（9）关于待插入DNA片段的获得参见附注。（二）大肠杆菌感受态的制备及重组DNA的转化1．感受态的制备（1...
.../l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18h，再用生理盐水透析5～7h，经葡聚糖凝胶G-50柱层析，除去游离荧光素，分装，贮存于4℃备用。...
...0.5μg加50μlTE（pH8.0）缓冲液中，再加入5μlg生物素-补骨脂素，溶解后，置365nm紫外光下直接照射20min，距离5cm，加等体积TE，移入用TE平衡的Sephadex G—50 柱（高1.0cm），离心法过柱，收集液体即为...
...PBS清洗3次后风干，再加HRP标记物的羊抗兔IgG（稀释度也要根据染色工作效价），37℃湿盒内放置45min。（4）PBS清洗3次后加新鲜配制的含3%H2O2pH7.6Tris缓冲液（10ml溶液中含二氨基联苯胺5mg）中暗处反应5～8...
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