核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备: (1)直接分离基因核酸:即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。 (2)化学合成基因核酸:即以单核苷酸为原料,以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚,分子量较小的寡核苷核。 (3)酶促合成核酸:在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板,利用逆转录酶合成单链cDNA,再以...
从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面,已取得很大成绩,这对产前诊断,早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。
T细胞中多种细胞因子基因转录水平的TCR/CD3介导的刺激4hr后明显提高。IL-2基因可以作为T细胞活化期间细胞因子基因转录调节的典型,IL-2对于大多数正常T细胞来说是一种自分泌生长因子,因此,其基因的转录调节对于T细胞活化是必需的,IL-2基因在TCR介导的正常T细胞刺激45nim-1hr内开始转录。细胞因子基因转录本RNA水平升高大部分是由于转录的增...
补体的两条激活途径有共同之处,又有各自的特点。在补体激活过程中,两条途径都是补体各成分的连锁反应,许多成分在相继活化后被裂解成一大一小两个片段;不同的片段或片段的复合物可在靶细胞表面向前移动,如C42,C423,C5b,C567,虽亦可原始的激活部位就地形成复合物,但仍以移动为主,在激活过程中,补体成分和(或)其裂解产物组成更大的复合物,同时又都在扩大其激活...
补体系统各成分通常多以非活性状态存在于血浆之中,当其被激活物质活化之后,才表现出各种生物学活性。补体系统的激活可以从C1开始;也可以越过C1、C2、C4,从C3开始。前一种激活途径称为经典途径(classical pathway)或替代途径。“经典”,“传统”只是意味着,人们早年从抗原体复合物激活补体的过程来研究补体激活的机制时,发现补体系统是从C1开始激活...
有许多物质(包括外源性致热原和体内某些产物)能够激活产内生致热原 细胞 而使其产生和释放 白细胞 致热原。下面介绍的仅是几种常见或重要的激活物。 (一) 微生物 革兰氏阴性 细菌 的菌壁含有 内毒素 (endotoxin,ET),后者是一种有代表性的细菌致热原(bacterial pyrogen)。给家兔微量静脉内或更微量脑内( 视前区 -前 下丘脑 )注射...
... 高热 、 抗原抗体复合物 、 休克 时持续的 缺血 、 缺氧 和 酸中毒 、 败血症 时的 细菌内毒素 等,在一定条件下皆可使 血管 内皮细胞发生损伤,使其下面的 胶原 暴露。胶原、 内毒素 等均为表面带负电荷的物质,当无活性的 凝血因子 Ⅻ与这些物质表面发生接触后,其 精氨酸 残基 上的 胍基 在负电荷影响下 分子 构型 发生改变,它的活性部分—— 丝氨...
(一)基本原理 染色体上基因位置分配的研究,又叫染色体图的研究,包括基因名称、基因在染色体的位置及与相邻基因的距离及其核酸序列的研究。研究基因图的方法包括家系的连锁分析法、体细胞杂交法、重组DNA技术和原位杂交法。果蝇的线形基因图和大肠杆菌、T 4 噬菌体两者的环状基因图都已绘成,目前正致力于 人类 基因图的绘制。人类基因约有5万~10万个,根据第八次国际人...
机体通过一系列的复杂的因素,调节补体系统的激活过程,使之反应适度。例如经C3b的正反馈途径即可扩大补体的生物学效应。但补体系统若过度激活,不仅无益地消耗大量补体成分,使机体 抗感染能力下降 ;而且在激活过程中产生的大量行物活性物质,会使机体发生剧烈的炎症反应或造成组织损伤,引起病理过程。这种过度激活及其所造成的不良后果,可通过调控机制而避免。这种调控机制包括...
正常细胞转化为癌细胞的过程称为“癌变”或“恶变”。癌变的原因和过程,至今尚不完全清楚。一般说来,人体正常细胞转变为癌细胞是一个复杂的过程,这个时间是相当长的,通常要十年或数十年的时间,是由量变到质变的过程。大多数科学家认为,细胞癌变是“基因突变”或“基因功能失调”的结果。在肿瘤研究中,发现人体细胞内天然就存在着一组能够引起细胞癌变的基因——“癌基因”。在正常...
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