1.组织固定和加工 用冰冻组织切片可直接进行溶菌酶免疫细胞化学研究。用冷酒精固定,4%福尔马林缓冲液或1.5%戊二醛固定均能进行免疫细胞化学染色。但浸蜡时温度不能超过60 ℃ ,载玻片应涂薄层 明胶 以防组织切片脱落。载片后,组织切片应放在50~56 ℃ 的烤箱中干燥但不能放在底层,因烤箱底层温度不均匀。组织切片应避免接触含油类的手和容器。组织块应放在4℃密...
...别原发及转移性肿瘤,因此对于汗腺肿瘤的诊断,分类及组织发生,还要结合常规组织病理改变及临床特点等多方面因素进行综合考虑。 皮脂 腺的免疫细胞化学特点。 目前可用于标记皮脂腺及皮脂腺肿瘤的抗体或酶有多种,包括角蛋白、EMA、MFG、CA及AEA等,但没有一种标记是皮脂腺所特有的。β 2 MG在 皮脂腺痣 、 皮脂腺腺瘤 及 皮脂腺癌 中也可呈阳性反应。近来报告...
免疫细胞化学技术已被广泛应用于皮肤科学领域,尤其在皮肤科的自身免疫性疾病如 天疱疮 、 大疱性类天疱疮 、 红斑狼疮 的诊断、病情和疗效判定及发病机理的研究方面,起着重要作用。现将免疫细胞化学在皮肤病学的应用简要介绍如下。
70年代以来,由于免疫组织化学方法的广泛应用,在技术方法上不断得以改进,涌现了一批新的技术方法,其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素(Lectin)、生物素(Biotin)和 葡萄 球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A, SPA)等被应用于免疫细胞化学技术,从而建立了SPA—HRP法、ABC法、BRAB法和LAB法等。...
核酸酶可分为两类:核酸外切酶(exonuclease)是从核酸的一端开始,一个接一个把核苷酸水解下来;核酸内切酶(endonuclease)则从核酸链中间水解3’,5’磷酸二酯键,将核酸链切断。很多细菌和细胞中都能识别外来的核酸并将其分解,1962年发现这是因为细菌中含有特异的核酸内切酶,能识别特定的核酸序列而将核酸切断;同时又伴随有特定的核酸修饰酶,最常见...
按限制酶的组成、与修饰酶活性关系,切断核酸的情况不同,分为三类: Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列,通常在识别位点周围400-700bp。这类酶的作用需要Mg2+,S腺苷甲硫氨酸及ATP。 Ⅱ类限制性核酸内切酶 与Ⅰ类酶相似,...
...检测方法,结果比较客观,将结果打印报告更适合于临床诊断和科学研究,应争取采用这些先进仪器和方法,改进结果的判断,记录和报告。 5.免疫酶组织化学检测自身抗体方法免疫酶组织化学间接法可以代替免疫荧光法用于自身抗体的检测,但尚未普遍采用。其优点是可以用普通显微镜观察结果,更适合于基层实验室使用,标本也可长期保存。 (1)抗原(与免疫荧光法相同)。 (2)操作方法...
胃肠道(包括胆囊及肝外胆道)的植物性神经分布有二个来源:①外源性神经(extrinsic nerve),指神经来自胃肠道以外的其它部位。②内源性神经(intrinsic nerve),指神经来自胃肠及胆道壁内的神经丛。要应用免疫细胞化学技术对消化道内源性神经进行研究,必须先了解消化管壁内神经丛的结构。
恶性淋巴瘤 总的可分为非何杰金 淋巴瘤 (NHL)与何杰金氏病两大部分。NHL的免疫功能分类繁多。总体上各类型的瘤细胞的免疫细胞化学标记与相应的正常细胞标记相一致。但是由于瘤细胞的基因有变异,分化不正常,其抗原性也发生变化。因此瘤细胞比相应正常细胞的表达要弱或丧失。在此不分型描述,而从应用角度分为下列三方面进行讨论:
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能有一种适用于所有抗原的固定剂,而是根据不同的抗原性质区别对待...
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