...典型皮损为单发性,环状淡紫色到紫色直径2~3mm的丘疹,周围绕以灰白边缘,灰白色边缘的外围为瘀斑性环,使皮损呈靶样外观。此环向外围扩展,最终消退。晚期皮损仅呈紫褐色稍高起的丘疹。皮损大多发生于中青年男性的躯干和四肢。 根据临床表现,结合...
...原位启动标记法(Primed in situ labelling,PRINS),又叫寡核苷酸启动法(Oligonucleotide-priming method)是Koch(1987)首先提出的,其基本原理是将未标记的寡核苷酸探针与细胞或...
...用得多,临床实验室用得较少,除成本高外,关键是操作复杂,重复性差,仅能半定量。成本高可随经济发展而缓和,但其它缺点尚需努力克服。杂交实验的探针应具有特异性,对应不同的杂交方法靶基因(被检基因)应有一定的纯度与丰度。杂交反应的开始是碰撞,探针...
...取上清加入等体积酚一氯仿(V/V),轻摇10 min,离心10000r/min×10min;取水相,加入250μl DW溶解。2、PCR扩增(1)引物设计:选择HSV1糖蛋白D基因为检测靶基因。NP-PCR 的引物和探针序列“外”引物...
...酶复合物。以上反应AP亦可用HRP代替。表18-3曱核酸探针的标记分子标记物性质标记分子标记方法杂交体的检测法放射性分子[α-32P]dNTPNT、PCR、RPI放射自显影或计数 [γ-32P]dNTPTL放射自显影或计数 125I碘化放射...
...Carnoy溶液、无水乙醇或4%多聚甲醛溶液固定5~15min。用蒸馏水冲洗,干燥,直接使用或保存于-20℃备用。在玻片上划20mm×28mm为免疫组化反应区。加入30μl PCR反应混合液,其中含10mmol/L TrispH8.3,50...
...分子杂交是核酸链间碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的...
...以Dig-UTP标记,注意探针不宜过长,否则影响对组织的穿透性。如过长,可事先用第二十章 介绍的探针水解法处理。3.杂交本步骤均在湿盒内进行,将杂交液滴滴于蜡膜上,将镍网载有切片面覆于液滴上,在65℃杂交至少3h。杂交液含:5×SSC,...
...Southern印迹杂交中应用,其特异性和灵敏性较高,价廉易购,国内已有试剂盒供应,军事医学科学院放射医学研究所马立人教授等研制和生产的光敏生物素核酸探针和检测试剂盒使用良好。方法步骤:在一灭菌Eppendorf管中加待标记DNa 5μg/...
...xenogeneic natural antibodies,XNAb),如猪和人之间。这种抗体能在血管吻合后的数分钟至1h内发生超急性排异反应(hyperacute rejection,HAR)导致血管内血栓形成和移植物功能丧失。在接触异种...
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