...美国Scripps研究所日前进行的一项新研究,揭示了胰腺干细胞扩增所需的重要信号途径。这项研究将有助于研发出能预防或逆转胰岛素依赖型糖尿病(IDDM,1型糖尿病)。该研究由美国健康研究院资助、为期5年,其研究结果公布在日前出版的《生物化学...
...目的基因后,可用以下方法大量扩增制备:①用体外DNA重组技术与载体DNA相连,转化至大肠杆菌中进行无性繁殖。以氯化铯超速离心纯化重组质粒DNA,并以合适限制性内切酶消化,经凝胶电泳制备回收特异的目的核酸片段。②聚合酶链式反应(Poly-...
...2。该功能区含有与抗原结合的部位。后者呈深槽状,其大小与形状适合于已处理的抗原片段,约容纳8~10个氨基酸残基。Ⅰ类分子的多态性残基也位于该区域。②胞外lg样区:该区又称为重链的α3片段,包括90个氨基酸残基,与免疫球蛋白的恒定区具有同源性...
...在ddNTP(2′,3′双脱氧核糖核苷三磷酸)存在下,复制延长随机受阻,形成分子量(长度)大小不等的片段。电泳分离,自显影,读图18-9分析碱基序列。图18-9 核酸碱基序列分析0.2-0.3mm厚度聚丙烯酰胺-尿素凝胶,高压(1600V)...
...加端PCR(add-PCR)是使扩增产物的5’-末端加一段DNA顺序的PCR。设计加端PCR的引物时,除与模板配对的那一部分外再加上若干碱基,这样使扩增产物的末端加上额外一段DNA,如加上一个限制酶的识别顺序或特定功能的DNA片段。...
...引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状DNA分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段;现已制备了酵母人工染色体(YAC)大的线状DNA...
...转录因子Sp-1和Ap-1识别序列。Sp-1,C/EBP、HNF-1和HNF-5在该区的位点有单个碱基错配。其他比第一个200bp更上游的顺式元件可被HNF-5,C/EBP和CTF/NF-1识别。MTP大亚基限制性片段长度多态性分析或简单...
...CCTGAGG序列,但不能切割突变了的CCTGTGG(A→T)。这样,由于突变消除了一个切点,使内切酶长度片段发生了改变,通过电泳,就可以区别正常的βA和βS(图13-10)。图13-10 镰状贫血的基因诊断除MstⅡ外,限制酶DdeⅠ(识别序列为...
... 60s,扩增35~40循环。表3 CMV PCR扩增所用的引物及探针引物及探针序列(5′→3′)位置片段大小IE1CCACCCGTGGTGCCAGCTCC早期基因159(bp)IE2CCCGCTCCTCCTGAGCACCCIE3(探针)...
...cDAN探针的制备。他们利用探针和Southern blot技术进行分子杂交,通过限制性片段长度多态性(restriction fragment-length polymerphism ,RFLP)分析实现了PKU的产前基因诊断。他们先用...
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