...这是最早用于性病诊断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组或质粒DNA。...
...梅毒的核酸探针 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 分子杂交法:阴性 阳性:梅毒感染。...
...(一)概述基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测人类遗传性疾病的基因缺陷和一些传染病病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来...
...了人苯丙氨酸羟化酶cDAN探针的制备。他们利用探针和Southern blot技术进行分子杂交,通过限制性片段长度多态性(restriction fragment-length polymerphism ,RFLP)分析实现了PKU的产前...
...,可增强人体的抗病能力。人乳的营养保健价值很高,在一定程度上与人乳富含乳铁蛋白肽有很大的关系。 由于多方面的因素制约,不大可能将人乳转化为商品,更不太可能用人乳作原料来提取和制备乳铁蛋白肽。可喜的是,牛初乳、鲜牛奶、奶酪、乳清以及其他...
...在研究心血管疾病时,主要运用显微注射法、基因打靶或基因剔除等方法制备各种TGM模型。1.显微注射法Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV40DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内,得到了带有这种外源DNA顺序...
...虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同,所不同的是:(1)杂交时需先在高温80~95℃短时处理,使DNA探针及细胞内靶DNA...
...RNA探针比cDNA探针的敏感性提高10倍以上,在许多优点。它们是单链,不需变性,也没有互补链的干扰,与靶基因杂交比DNA探针更稳定。Bio-11-dUTP可通过Sp6、T3和T7RNA聚合酶掺入到RNA转录子中。标记方法:其下列反应体积...
...(一)cRNA探针的同位素标记1.标记液(转录标记)2.转录缓冲液※:用地高辛或生物素标记时,用UTP替代。3.标记终止液4.标记探针水解液先用dH2O悬浮探针,再加入后两种试剂,轻轻振摇混合,于60℃条件下反应。5.探针水解时间注:LO...
...还制备出淋病奈瑟菌DNA探针、菌毛探针和RNA探针,也建立了各种特异性高,敏感性强、简便快速的右面放射性标记的检测系统,成为淋病奈瑟菌及其抗药性检查的重要方法。(四)阴道加德钠菌阴道加德钠菌(Gardherellavaginalis;GV)...
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