...产物的堆积,使原来以指数增加的速率变成平坦的曲线。造成PCR进入平坡的原因有:引物和dNTP等消耗完毕、Taq酶失活,这几中因素在标准反应中均不会出现。此外,还有几种可能:1.底物过剩因DNA合成量多于反应液中存在的Taq酶,在100μl反应...
...(DNa polymerase)的作用是将1个脱氧三磷酸核苷酸加到引物(primer)的3’-OH上,释放出一个焦磷酸分子(ppi),如下式表示。聚合酶主要有以下几种:1.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大肠杆菌DNA聚合酶(E.ColiDNA ...
...离心1min。④同样洗涤沉淀2次,收集沉淀。⑤ 加入50μl 蒸馏水,于55℃作用15min。⑥15000r/min离心2min,收集上清(含HCMV DNA),进行PCR扩增,将此悬液于100℃加热10min,并迅速于冰浴中冷却。(三)引物...
...许多疾病的遗传异质性,以及多数遗传的基因异常尚属未知,目前能直接诊断的病种虽日益增多,但仍然是比较有限的。表13-2 遗传的基因诊断方法基因异常方法探针、引物或限制酶基因缺失基因组DNA印迹杂交 PCR扩增缺失基因的探针 引物包括缺失或在...
...标记cDNA探钊与细胞或组织切片进行原位杂交,然后进行放射自显影。3.细胞因子mRNA经反转录为cDNA,用特异性细胞因子引物经聚合酶链反应(PCR)扩增细胞因子cDNA,Southern blot后用标记探针检测特异细胞因子DNA水平。(...
...引也。从反廾。凡𠬜之屬皆从𠬜。𢸅,𠬜或从手从樊。普班切 (𠬜) 引也。上林賦。仰橑而椚天。晉灼曰。古攀字。按今字皆用攀則爲古字。亦小篆也。从反。象引物於外。普班切。十四部。凡之屬皆从。 (𢸅) 或从手从樊。樊聲也。今作攀。公羊...
...引也。从反廾。凡𠬜之屬皆从𠬜。𢸅,𠬜或从手从樊。普班切 (𠬜) 引也。上林賦。仰橑而椚天。晉灼曰。古攀字。按今字皆用攀則爲古字。亦小篆也。从反。象引物於外。普班切。十四部。凡之屬皆从。 (𢸅) 或从手从樊。樊聲也。今作攀。公羊...
...每个基因的转录都受到相对独立的控制(图17-2);(2)转录是不对称的。(3)转录时不需要引物,而且RNA链的合成是连续的。...
...末端。二是有’3’→5’外切酶活力,能识别和消除错配的引物末端,与复制过程中校正功能有关。三是5’→3’外切酶活力,它能从5’端水解核苷酸,还能经过几个核苷酸起作用,切除错配的核苷酸。1985年Mullis 等发明了PCR方法,以...
...病人标本中的病毒DNA。2.多聚酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR) 一种体外基因扩增法。先将待检标本DNA热变性为单股DNA做为模板,加一对人工合成的与模板DNA两端各20个硷基互补的引物,在耐热DNA...
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