医学免疫学/分子生物学技术免疫学诊断中的应用

一、BCR和TCR 基因 重排检测 对 血细胞 恶性变如 白血病 、 淋巴瘤 等的诊断,长期以来多应用 细胞形态学 检查和 免疫细胞 表型 分析。由于这些方法在特异性和敏感性上的限制,对于丢失了 细胞表面 标志,或 分化 较好难以和正常 细胞 区别。也可能由于恶性细胞数量少,混在大量正常细胞中难以查出。近年来由于 分子 生物学 技术的广泛应用,且由于获得了I...

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免疫技术发展史_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...的结构和金属性质。在1939年Kausche和Ruska把 烟草 花叶 病毒吸附到金颗粒上在电子显微镜下观察见金离子呈高电子密度。然而胶体金技术作为标记物应用于免疫组织化学研究是在1971年,Faulk 和Taylor首先将兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合,用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原。此后,他们还把胶体金与抗胶原血清,植物血凝素,卵白蛋白...

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ELISA的技术要点_《免疫学和免疫学检验》在线阅读_【中医宝典】

ELISA的技术要点包括三个方面:试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。

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免疫细胞化学的有关技术概述_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

根据标记物的不同,免疫细胞化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术免疫酶细胞化学技术免疫铁蛋白技术免疫金-银细胞化学技术,亲和免疫细胞化学技术免疫电子显微镜技术等。近些年来,核酸分子原位杂交技术采用生物素、地高辛等非放射性物质标记探针,和免疫细胞化学技术密切结合,发展为杂交免疫细胞化学技术。不同的免疫细胞化学技术,各具有独特的试剂和方法,但其基本技术方法是...

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制备单克隆抗体的基本技术_《免疫学和免疫学检验》_【中医宝典大全】

制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...

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毛细管电泳

【 毛细管电泳 】是以弹性石英 毛细管 为分离通道,以 高压 直流电场为驱动力,依据样品中各组分间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。 【所用设备】主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的弹性石英毛细管、 电极 槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、 激光 诱...

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免疫荧光细胞化学技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

免疫荧光细胞化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一,是由Coons等(1950)建立,经过近43年的发展,免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学。它与亲合化学技术如 葡萄 球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域;与激光技术、电子计算机和扫描电视等技术结合发展为定量免疫荧光细胞化学技术;荧光激...

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断裂—标记免疫电镜技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

此法是先进行冷冻断裂,再做免疫标记,从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。 (1)临界点干燥法 ①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4 ℃ 1~2h,PBS冲洗3min×3。 如为细胞悬液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝胶化,将凝胶切成2mm左右的小块,用30%的甘油—PBS浸透后置于用液氮冷却的Freon中冷却。 ②冷冻断裂,...

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亲合组织化学技术免疫细胞化学技术的某些进展_《实用免疫细胞与核酸》_【中医宝典大全】

70年代以来,由于免疫组织化学方法的广泛应用,在技术方法上不断得以改进,涌现了一批新的技术方法,其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素(Lectin)、生物素(Biotin)和 葡萄 球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A, SPA)等被应用于免疫细胞化学技术,从而建立了SPA—HRP法、ABC法、BRAB法和LAB法等。...

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HLA分型技术_《医学免疫学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标,免疫遗传学研究的发展,很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性;80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。

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