...min；三蒸水补足体积至49μl，DNA聚合酶i 5u，混匀，14℃过夜，加0.5mmol/l ED-TA(Ph8.0)1μl终止反应。 已标记探针的提纯：10mg/ml tRNA 2μl,10mmol/L Tris –HCl (pH7.5)150μl,2.5倍体积的95%乙醇，置液氮中15min或-20℃过夜。15000r/min，离心10min，真空干燥...
1．单面法 以不同直径的金粒分别标记两种不同的抗体，以间接法先染第一种抗体，洗净后再染第二抗体。 2．双面法 以不同直径的金粒标记的抗体于镍网的两面分另进行免疫染色。本法的优点是可防止两种金标记的抗体的相互干扰，又可防止第一次应用的一抗与其相应的抗原相结合，占据了空间，第二次应用的抗体没有适合的空间使之与相应的抗原相结合。 3．异种动物抗原—抗体染色法 如一...
1．巯基化藻红蛋白（phycoerthrin PE）的制备，600μl的15.5mg/ml盐酸巯醇亚胺（iminothiolane hydrochloride）加到1.2ml的3.6mg/ml的PE中，和1.2ml PB、pH6.8 混合，装入透析袋置入50mmol/l pH6.8 PB中透析，4℃过夜，再换用pH7.5PB透析6h。每个PE分子中可结合8个
（一）组织切片的原位杂交细胞化学方法 （1）组织准备：大鼠以10%水合氯醛（0.3ml/100g 体重），或1%戊巴比妥钠约1ml（3～4mg/100g体重）腹腔内注射麻醉，用100ml生理盐水冲洗和150ml 4%多聚甲醛主动脉灌注固定。固定半小时后，取出组织块，置入4%多聚甲醛液中后固定4～6h，4℃。 如要取脑组织，可于灌注后置4℃冰箱内过夜，次晨取脑...
...。图5.2中10nm的胶体金溶液中蛋白质的最适稳定量为45μg/ml。 图5-2 蛋白最适稳定量示意图 （2）目测法：以目测法确定胶体金与待标记蛋白质用量比例，将标记的蛋白质逐级稀释后（由5μg～45μg另设对照管），各取等体积顺序加入一系列装有1ml胶体金的试管中，5min后，在上述各管内分别加入0.1ml 10%氯化钠，依表5-5顺序进行。 表5-5 具...
在电镜水平应用较为广泛，因该法具有特异性中、灵敏度高、方法简便和背景染色淡等优点。蛋白A的免疫特异性在第五章 已作了介绍，PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用，蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性...
（一）基本原理 在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后，科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似，首先利用地高辛修饰核酸探针，与细胞或组织进行杂交，再用抗地高辛抗血清相连胶体金与之结合，进行细胞或组织特异核苷酸的超威结构定位。为增强金的显示效应，可用银加强法增强...
标记染色体 ：在 肿瘤细胞 内常见到结构异常的 染色体 ，如果一种异常的染色体较多地出现在某种 肿瘤 的细胞内，就称为标记染色体，可分为特异性和非特异性标记染色体两种。如 慢性粒细胞性白血病 中的 费城染色体 即Ph小体。特异性标记染色体是指经常出现于同一种肿瘤内的标记染色体
isotope labelling 化合物 中的原子被其 同位素 ( 放射性同位素 或稳定同位素)的示踪原子所取代的标记。 取代后化合物的理化性质差异不大，也称为理想标记。
标记原子 1abe11ed atom 亦称示踪原子。是一种元素中天然含量较少或不含有的原子。示踪原子可以是 放射性 的或非放射性的 同位素 。将示踪原于引入一种 化合物 中，则后者称为示踪化合物或标记化合物。标记化合物常用于植物营养问题或 代谢 问题的研究，是一种非常有效的手段。
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