...使携载基因能促进内皮细胞的生长,已成为该领域研究的热点。 为突破这一研究瓶颈,陶思丰等研究人员采用体外实验研究的方法,选用PTFE为血管材料载体,将pC鄄DI-hVEGF121质粒溶液注入PTFE人工血管,使其质粒进入人工血管壁的孔隙中。接着,将从人脐静脉中分离培养的内皮细胞,种植到携带VEGF基因质粒的PTFE材料表面,经6、24、72和120小时时间点的...
一、质粒DNA的提取及鉴定
(一)载体 载体(Vector)是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具。载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记;有供外源DNA插入的位点;本身体积小等特征。 质粒存在于多种细菌,是染色体(核)以外的独立遗传因子,由双链环状DNA组...
(一)载体 载体(Vector)是把外源 DNA (目的 基因 )导入 宿主 细胞 ,使之 传代 、 扩增 、表达的工具。载体有 质粒 (plasmid)、 噬菌体 、 单链 丝状噬菌体和 粘性末端 质粒(粘粒)、 病毒 等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的 遗传标记 ;有供外源DNA插入的 位点 ;本身体积小等特征。 质粒存在于多种 细菌 ...
... ,并 转录 表达出与该外源性DNA相应的 信使RNA 或 蛋白质 。 DNA重组技术 的主要步骤是: ① 选择并分离能携带外源性 DNA的载体。常用的DNA载体有 细菌 质粒 ( 染色体 外DNA),或 噬菌体 DNA,如 大肠杆菌 质粒CoLEI及pBR322;λ噬菌体及M13噬菌体DNA等,它们都能插入(或整合)一定长度的外源性DNA片段,并能在寄主细...
取HBV质粒DNA0.5μg,DNase I(SABC)2pg, 10×NBTμl,三蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;加5mmol/l dATP dGTP dCTP Bio –11- dUTP各2μl,10×NBt 4μl,三蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;三蒸水补足体积至49μl,DNA聚合酶i 5u,混匀,14℃过夜,加0.5mm...
在 分子 水平上提供一种 纯化 和 扩增 特定DNA片段的方法。常含有目的 基因 ,用体外 重组 方法将它们插入 克隆载体 ,形成重组克隆载体,通过转化与 转导 的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。 克隆(clone,clon)一词源于希腊文Klon,...
...2年 晏菊芳,鲍朗,胡昌华,李学敏,张会东 文章摘要 来源文章摘要:目的 检测含有强毒赖型 钩体 OmpL1 外膜 蛋白 基因的 2个 重组质粒 pBC OmpL1和pcDNA3 OmpL1在哺乳动物 细胞 中的表达 ,及其作为DNA 疫苗 诱导小鼠 体液免疫 应答的效果。方法 采用 脂质体 转染 法 ,以重组质粒转染COS7细胞 ,通过抗性标志筛选稳定转染...
...d ,又译 黏粒 )是一种以 λ噬菌体 (Lambda phage)中的 cos sequences 所建构而成的 质体 ,是常用的 选殖 载体(cloning vector)之一,可用于建构 基因组 库。最高可置入44000个 碱基对 ,高于 质粒 的10000到15000。 参考文献 Bruce A. Voyles (2002) The biology ...
...。这项研究成果为胃癌的免疫治疗提供了一条新途径。 近年来,肿瘤疫苗的研究已成为肿瘤免疫治疗研究的热点领域。将编码肿瘤抗原的基因克隆入真核表达载体构建的DNA疫苗具有容易大量制备、诱导免疫反应广谱、高效、持久等优点,已得到广泛研究和应用。而胃癌作为消化系统常见的恶性肿瘤,由于缺少特异性抗原,目前尚未研究出一种有效的疫苗。胃癌MG7-Ag是西京医院全军消化病研究...
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