...不论使用何种制备方法,要获得合格的标记化合物,都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外,一些标记化合物,经过一定时间的存放后,往往会出现不纯物,而需再纯化。如碘标记生长激素(125--HGH),在刚标记的第2天,从Sephadex G-...
...的荧光,组织内含有的奎宁、四环素等药物也呈现一定的荧光。细胞内的某些成分可与荧光素结合而显荧光,如溴化乙锭与吖啶橙可与DNA综合,进行细胞内DNA含量测定。荧光显微镜更广泛用于免疫细胞化学研究,即以异硫氰酸或罗丹明等荧光素标记抗体(一抗或二...
...金属类标记物的免疫标记法同切片免疫染色,即将标记物与抗体相结合,通过直接或间接法显示抗原部位。胶体金可与蛋白A相结合后与IgG分子中的Fc 段相结合。哪与卵白素(a-vidin)相结合可与结合抗体的生物素(biotin)反应。免疫金银...
...Eagle液培养及上述条件孵育,48h细胞不仅贴附于玻片上并已长成单细胞层。取出玻片用丙酮固定15min,自然干燥后待用,或保存于-20℃或4℃中。表15-3 各种抗核抗体及临床意义抗体名别名临床意义抗Sm抗体 SLE标记抗体,阳性率15~28%...
...封片。结果:阳性为棕色,阴性为蓝色。在第3步之后可用1%H2O2作用15min消除内源酶干扰。6.自身抗体的联合检测方法在血清中存在的多种自身抗体,可用多种组织抗原组合制作成复合抗原检测。抗原组成可包括以下组织:(1)肝脏:①检出抗核抗体;...
...上述各种方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,...
...细胞,用E玫瑰花结反应和EAC玫瑰花结反应鉴别T、B细胞比例。或用荧光素标记抗体法进行OKT试验,检测T3阳性细胞,确定T细胞比例。同时,用荧光素标记抗体法检测T4和T8表面抗原的T细胞,以确定TH和TS的比值。正常人的TH与TS之比为1.2...
...电磁搅拌。(3)在室温中搅拌2h,避光。(4)把结合物移入直径3cm,高30cm大小的Bio –Gel P-6层析柱(用0.01mol/l pH8.0的PBS平衡过),流速为1.5ml/min。(5)收集先流出的红色结合物,即为标记抗体,...
...RIA或RRA标记试剂。方法的原理是:作一条常规的RIA(或RRA)标准曲线,另作一条不加非标记标准品,只加抗体和不同量标记试剂的自身取代曲线。两者用同一种抗体,且抗体用量完全相同。若反应平衡后测定结合部分的放射性,掏算成所加总放射性(注意:...
...封片。结果:阳性为棕色,阴性为蓝色。在第3步之后可用1%H2O2作用15min消除内源酶干扰。6.自身抗体的联合检测方法在血清中存在的多种自身抗体,可用多种组织抗原组合制作成复合抗原检测。抗原组成可包括以下组织:(1)肝脏:①检出抗核抗体;...
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