...ester, DNP)。通过酰胺化反应把半抗原结合到抗体分子上。在间接法(二步法)中,先以半抗原标记的特异性抗体(第一抗体)孵育切片,然后加入半抗原的标记抗体,(标记物可为荧光素或酶)(图6-4)。在PAP染色(三步法)中,先用半抗原标记的第一...
...ester, DNP)。通过酰胺化反应把半抗原结合到抗体分子上。在间接法(二步法)中,先以半抗原标记的特异性抗体(第一抗体)孵育切片,然后加入半抗原的标记抗体,(标记物可为荧光素或酶)(图6-4)。在PAP染色(三步法)中,先用半抗原标记的第一...
...免疫血清制备大致相同(见第二章 )。所不同的是:①凝集素具有较强的毒性,易使被免疫动物发病或甚至死亡。解决的方法是经处理使凝集素变性,从而减低其毒性,但同时要保证其抗原性不受或少受破坏。②要设法阻断凝集素的糖结合部位,以减少对这些部位的抗体的...
...的荧光,组织内含有的奎宁、四环素等药物也呈现一定的荧光。细胞内的某些成分可与荧光素结合而显荧光,如溴化乙锭与吖啶橙可与DNA综合,进行细胞内DNA含量测定。荧光显微镜更广泛用于免疫细胞化学研究,即以异硫氰酸或罗丹明等荧光素标记抗体(一抗或二...
...电磁搅拌。(3)在室温中搅拌2h,避光。(4)把结合物移入直径3cm,高30cm大小的Bio –Gel P-6层析柱(用0.01mol/l pH8.0的PBS平衡过),流速为1.5ml/min。(5)收集先流出的红色结合物,即为标记抗体,...
...凝胶色谱法(SephadexG-200/Sephacryl S-200) 等分离标记抗体。注意:该方法要求HRP的RZ值在3.0左右,游离氨基较少,与戊二醛反应后,制成的酶标抗体大部分为单体;而RZ值小于2.8的HRP,含有较多的游离氨基,与...
...FITC荧光素或HRP标记的抗人Igg 抗体处理。如果病人血清中存在有抗肾小球基底膜抗体,即可与切片上的肾小球基底膜相结合,进一步与荧光标记抗人IgG抗体相反应,而显示沿肾小球毛细血管壁呈连续线形之荧光分布(酶标抗体亦显示同样之连续线形分布)...
...,风干待染。2.荧光素标记抗体 异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocynate, FITC)标记抗体的具体步骤详见第三章 。在标记络丹明B200(lissamine rhodamin B200,RB200)时应注意:(1...
...化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定(chemiluminescentimmunoassay,CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。用作标记的化学发光剂应符合以下几个条件:①能参与化学发光反应;②与抗原或抗体...
...荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原...
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