...DNA片段均参入了标记物,用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好,简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度,可以大量制备。此法有普遍应用价值。标记方法如下:待标DNA模板1ng,50mmol/L KCl, 10mmol/L ...
...DNA含量分析技术是80年代以来迅速发展的一门新型检测技术,已广泛应用于肿瘤临床及基础理论的研究。其中流式细胞术(Flowcytometry,FCM)是一种快速定量分析细胞核DNA含量的技术,其在推测患者预后及治疗反应上具有重要的价值[1...
...处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式,修复结果只是能维持基因组的完整性,提高细胞的生成率,但留下的错误较多,故又称为错误倾向修复(error�prone repair),使细胞有较高的突变率。图16-23 SOS修复如图16-23所示,...
...利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交...
...由北京医院卫生部临床检验中心分子生物学实验室主任蔡剑平博士领导的课题组,经过3个月的日夜奋战,最近完成了SARS冠状病毒全基因组基因的克隆工作。有关专家指出,SARS病毒全基因组基因的克隆成功,永久地保留了SARS冠状病毒的遗传物质,并可...
...测定出人基因组全部DNA3×109碱基对的序列、确定人类约5-10万个基因的一级结构,这将使人类能够更好掌握自己的命运。3 单克隆抗体及基因工程抗体的建立和发展1975年Kohler和Milstein首次用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆...
...当用一段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。由此可见,进行基因检测有两个必要条件,一是必需的特异的DNA探针;二是必需的...
...据英国《新科学家》杂志网站报道,德国科学家最近绘制出了痤疮杆菌的基因组图谱,在此基础上有望研究出新药物和疗法,来对付令人烦恼的青春痘。 痤疮是很常见的皮肤问题,许多人特别是青少年为之困扰。痤疮杆菌是毛囊中的一种细菌,当毛囊中的皮脂积聚过...
...包装成噬菌体颗粒的限度;③细菌的菌落体积远大于噬菌斑,因此如用柯斯质粒制备基因文库,则筛选所需的含某一DNA片段的菌落很费时间。现虽建立了高密度菌落筛选法,但由于柯斯质粒制成的基因文库常常不太稳定,插入的大片段外源DNA有可能通过同宿主基因组...
...从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面,已取得很大成绩,这对产前诊断,早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。一、分离基因进行结构分析利用DNA离体转化,制备探针,制备基因文库进行...
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