...原位杂交免疫细胞化学技术,简言之,就是利用放射性同位素(或生物素)标记的cDNA片段与组织或细胞中特异的mRNA进行杂交来观察mRNA在体内的分布(详第二十章 )。发展这项技术,对发现神经系统特有的蛋白质或肽类,具有极大的潜力,如脑内特有的...
...细胞表面糖;用标记抗体可测表面抗原;用标记多聚阳离子可检测细胞表面电荷;用标记的激素、生长因子、神经递质和病毒等可检测细胞受体;用标记的大分子、微生物等可检测细胞的内吞性;用荧光素标记的亲和素以及带有DUTP的生物素衍生物的DNA探针跟靶细胞...
...hybridization)就是分子杂交技术在基因定位中的应用,也是一种直接进行基因定位的方法。分子杂交的基本原理是碱基的互补配对,同源的DNA-DNA双链或DNA-RNA链在一定条件下能结合成双链,用放射性或非放射性物质标记的DNA或RNA分子作为探针...
...hybridization)就是分子杂交技术在基因定位中的应用,也是一种直接进行基因定位的方法。分子杂交的基本原理是碱基的互补配对,同源的DNA-DNA双链或DNA-RNA链在一定条件下能结合成双链,用放射性或非放射性物质标记的DNA或RNA分子作为探针...
...蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;三蒸水补足体积至49μl,DNA聚合酶i 5u,混匀,14℃过夜,加0.5mmol/l ED-TA(Ph8.0)1μl终止反应。已标记探针的提纯:10mg/ml tRNA 2μl,10mmol/L...
...立人教授等合成光敏生物素并研制成功光敏生物素核酸探针标记和检测试剂盒。至今,在国内外市场上已有多种商品化非放射性标记核酸探针试剂盒供应。利用核酸探针杂交技术比用免疫学抗原抗体技术有更高的特异性和敏感性等优点,已显示出巨大的发展潜力。许多核酸(...
...立人教授等合成光敏生物素并研制成功光敏生物素核酸探针标记和检测试剂盒。至今,在国内外市场上已有多种商品化非放射性标记核酸探针试剂盒供应。利用核酸探针杂交技术比用免疫学抗原抗体技术有更高的特异性和敏感性等优点,已显示出巨大的发展潜力。许多核酸(...
...DNA片段均参入了标记物,用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好,简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度,可以大量制备。此法有普遍应用价值。标记方法如下:待标DNA模板1ng,50mmol/L KCl, 10mmol/L ...
...原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。...
...模板转录生成RNA。这种体外转录反应效率很高,在1小时内可合成近10μg的RNA产物。只要在底物中加入适量的放射性或生物素标记的dUTP,则所合成的RNA可得高效标记。该方法能有效地控制探针的长度并可提高标记分子的利用率。RNA探针和...
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