通过核酸标记技术可将细胞因子cDNA作为基因探钊检测细胞内细胞因子基因组DNA或mRNA。主要有以下几种方法: 1.应用同位素(或非同位素)标记的cDNA探针,检测经Northernblot后细胞因子mRNA水平或采用打点杂交法。 2.应用标记cDNA探钊与细胞或组织切片进行原位杂交,然后进行放射自显影。 3.细胞因子mRNA经反转录为cDNA,用特异性细胞...
原位杂交技术 (In situ hybridization,ISH)是 分子 生物学 、 组织化学 及 细胞学 相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾 核糖体 基因探针 与其 卵母细胞 杂交,将该 基因 进行定位,与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利...
核酸 是由 核苷酸 聚合而成的 高分子化合物 ,是所有 生物 遗传信息 的 携带者 。根据核苷酸 分子 中 戊糖 的类型,将核酸分为 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )两大类。 核苷酸由 磷酸基 、戊糖和 含氮碱基 组成, 碱基 包括嘌呤和 嘧啶 两大类。DNA一般含A、C、G、T四种碱基,RNA含A、C、G、U四种碱基。 四种核苷酸按...
核酸 是生物体内的 高分子化合物 ,包括 DNA 和 RNA 两大类。 一、元素组成 组成核酸的元素有C、H、O、N、P等,与 蛋白质 比较,其组成上有两个特点:一是核酸一般不含元素S,二是核酸中P元素的含量较多并且恒定,约占9~10%。因此,核酸定量测定的经典方法,是以测定P含量来代表核酸量。 二、 化学 组成与基本单位 核酸经水解可得到很多 核苷酸 ,因...
荧光原位杂交 方法是一种 物理图谱 绘制方法,使用 荧光素 标记 探针 ,以检测探针和分裂中期的 染色体 或 分裂间期 的 染色质 的杂交。 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世纪80年代末在 放射性 原位杂交技术 的基础上发展起来的一种非放射性 分子 细胞遗传技术,以 荧光标记 取代 同...
核酸是生物体内的高分子化合物,包括DNA和RNA两大类。
是指将待测的DNA变性后点加在 硝酸 纤维素膜(或 尼龙 膜,NC膜)上,用已标记的 探针 进行杂交,洗膜(除去未接合的探针), 放射自显影 ,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于 基因 缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交 (Dot blot)是将被检 标本 点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市...
载体(vector)是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子,在进入受体后形成一个复制子,即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此,作为载体应该满足以下几方面的要求:①有某种限制酶的一个切点,最好是有许多种限制酶的切点,而且每种酶的切点只有一个;②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制,载体应...
...(nuclein);后来他又从鲭鱼 精子 中分离出类似的物质,并指出它是由一种 碱性蛋白质 与一种酸性物质组成的,此酸性物质即是现在所知的 核酸 (nucleic acid)。1944年Oswald Avery,Colin Macleod和Maclyn McCarty发现,一种有夹膜、具 致病性 的 肺炎 球菌中提取的核酸桪NA(deoxyribonucle...
核酸是生物体内的高分子化合物,包括DNA和RNA两大类。
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