...-）又称异羟基洋 地黄 毒甙配基，这种类固醇半抗原仅限于 洋地黄 类植物，其抗体与其它任何固醇类似物如人体中的性激素等无交叉反应，地高辛配基标记于脱氧尿嘧啶三磷酸核苷（dUTP）上形成digoxigenin –11-dUTP（图20-3）。通过随机引物或缺口翻译法（多用随机引物法），将dig-11-dUTP与探针的核酸分子相连，构成Dig-配基标记的核酸探针...
胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带...
取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。 取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18...
如前所述，若我们把角蛋白视为上皮性肿瘤的共性免疫标记物，则对不同器官的上皮性肿瘤具有特别或优先识别作用的标记物，可看作为器官特异性或相对特异性标记物。经过长期实践的检验，一些上皮器官特异性标记物已为人们所接受。此外，也发出了一些效果较肯定、特异性较好、诊断作用较明确的新的标记物。现将其生物化学本质、肿瘤表达情况及诊断应用附表如下（表12-5），并将其在上皮组...
... 基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础，在核酸水平检测 人类 遗传性疾病的基因缺陷和一些 传染病 病原体的方法。其基本过程是：制备DNA探针，标记探针，检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来标记探针DNA。近年来，非同位素标记方法发展很快，已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法，是较为成功的...
（1）新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。 （2）PBS（pH7.5）冲洗3min×2，加入1mmol/l MgCl 2 蒸馏水洗洗3min×3，离心沉集细胞。 （3）将细胞团置于小纸板上，入液氮冷却的Freon中，取出入冷冻蚀刻仪中进行断裂操作，再于-100 ℃ 蚀刻1min 。 （4）制做断裂面复型。 （5）再次氯酸钠清洗复型，蒸馏水洗后进行观察...
作为示踪剂及分析试剂的标记化合物，应具有比一般非标记化合物更高的质量要求。标记化合物的质量指标包括：放射性核纯度、放射化学纯度、放射性比活度、生物活性和免疫活性以及标记位置和定量分布情况等。 1．放射性核纯度及其检查方法 （1）放射性核纯芳可用下式表示： 放射性核纯度（%）=所需放射性核素的活度/样品的总放射性活度×100 （2）放射性核纯度的检查方法：每一...
Matritech公司和来自Johns Hopkins医院的研究者报告说，他们鉴别出的一种蛋白有可能是 前列腺癌 的一个标记物。 研究者在36名诊断为前列腺癌的患者血液中发现了这种特异的蛋白，在此之前其中8名患者的PSA(前列腺特异抗原)检查结果呈假阴性，但他们体内都明显存在这种特异蛋白。而20名健康人体内并不存在该蛋白。该研究报告在美国临床化学协会(AAC...
...也没有互补链的干扰，与靶基因杂交比DNA探针更稳定。Bio-11-dUTP可通过Sp6、T 3 和T 7 RNA聚合酶掺入到RNA转录子中。标记方法：其下列反应体积为50μl：40mmol/l Tris HCl pH8.0、8mmol/l MgCl 2 、2mmol/L亚精胺、25mmol/l NaCl, 1mmol/L每一ATP、GTP、GTP，1mmol...
LP-PCR（Labelled Primers PCR）是利用同位素、荧光素等对PCR引物5’端进行标记，据此检测目的基因的存在与否，与常规PCR相比更为直观，省去了限制性内切酶酶切及分子杂交等繁琐步骤，而且一次可以同时分析多种基因成分，因而特别适合于大量临床标本的基因诊断。目前该方法只对PCR产物进行定性鉴定。 彩色PCR（Colorcomplement ...
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