用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果 1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10-7系列稀释的抗原,斑点直径0.25cm, 空气中干燥,80℃多聚甲醛蒸气固定1h,然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥抗联接胶体铁标记物的间接法染色,普鲁士蓝呈色观察。一步法所难检测到的抗原量为10-2~10-3μg,间接法 敏感性至少增...
美国康宁公司日前宣布正式推出一种使用光学传感器技术的非标记高通量筛选平台Epic系统。该系统应用于生物化学和基于细胞的药物开发,能帮助药物研发公司对前景良好的新药进行评估。此外通过该系统还能观察以前在高通量检测应用中无法检测到的生物化学直接相互作用。 该系统使用光学技术降低了对标记物的需求。它是由两个基本部件所组成:一个带有生物传感器的一次性384微孔板和一...
不论使用何种制备方法,要获得合格的标记化合物,都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外,一些标记化合物,经过一定时间的存放后,往往会出现不纯物,而需再纯化。如碘标记生长激素( 125 --HGH),在刚标记的第2天,从Sephadex G-100过滤谱上可见,几乎所有的碘化HGH都集中在峰II;保存1个月后,峰II组份减少,峰I和峰III成分明显增加,峰I是...
在RIA中,标记抗原质量的优劣,直接影响测定结果,必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原,并保持免疫活性不受丧失。
为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞125I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用125I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成纤维细胞)、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育,使LDL-R与125I-LDL充分结合,形成受体-配体复合物,再除去未结合的1...
...血缺氧所引起的临床综合征,常并发心律失常、心力衰竭、猝死等急性事件。因此,在研究心绞痛发病机制的基础上,进一步探求敏感性和特异性均较高的血浆标记物,对于心绞痛诊断、危险度分层、预后判断及治疗至关重要。笔者检索了近10年来的文献资料,就反映冠心病发病机制中血管舒缩功能异常、纤溶和凝血系统异常及炎性反应的血浆标记物的研究进展概述如下。 血栓素A2与前列腺素2(血...
用于 软组织肿瘤 可在石蜡切片表达的抗体已有多种,请参见表12-1。 表12-1 软组织细胞可用的标记抗体 抗原名称 标记细胞 (1)角蛋白(Keratin) 上皮与肌上皮细胞 (2)波纹蛋(Vimentin) 间叶分化细胞、内皮细胞 (3)结蛋白(Desmin) 肌组织分化细胞 (4)肌动蛋白(Actin) 肌细胞,肌上皮细胞,肌纤维 (5)肌浆球蛋白(M...
...EK-293所储存的Ca(2+)。对HeLa细胞内Ca(2+)进行检测时发现,TrkPC1的表达可增强由组胺激发的胞浆内Ca(2+)的增加,甚至即使在细胞外Ca(2+)不存在的情况下也同样可增加胞浆内Ca(2+)浓度。 Aguiari等总结认为,这些观察结果表明肾脏内及其它上皮细胞中的PC1 C末端不仅可上调Ca(2+)通道活性,也可能涉及细胞内储存的释放。
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