载脂蛋白基因的分离是通过用相应的cDNA作为探针筛选基因文库而完成的。比较基因的核苷酸序列与cDNA的核苷酸序列得以鉴定基因的内含子与外显子数目以及它们的分界线。大部分真核细胞的基因含有内含子,内含子不编码氨基酸,但有些内含子参与基因表达的调控。外显子通常占据基因内的三个区域:第一个区域不编码氨基酸,含有RNA转录起始以及导向mRNA至核糖体合成蛋白质的信号...
一、脂蛋白脂肪酶 LPL的功能主要是催化水解VLDL颗粒和乳糜微粒内的甘油三酯。将 人类 LPL基因在小鼠体内高效表达后,脂肪组织内LPL活性升高7倍以上,血浆肝素后脂解活性升高二倍,而血浆甘油三酯水平降低75%,HDL2-C则上升约2倍,动力学研究显示VLDL和餐后血浆脂质清除加快,这种小鼠能抵抗高脂饲料所诱导的高胆固醇血症。这些结果表明LPL的增强表达能...
1.目的基因的设计 在进行转基因动物研究时,首先要针对实验目的设计待转移的目的基因,如随机整合型基因或基因敲除(gene knockout)型载体基因。随机整合型基因可来自于同一基因,也可来自于不同基因(拼接基因)。从结构上看,随机整合型基因可分为结构基因与调控序列两部分。若来自于同一个基因,那么该基因必须完整,包括5'上游启动子区和3'下游的加尾信号(po...
一、ApoAⅠ ApoAⅠ是HDL的主要蛋白,占HDL总蛋白的70%。1989年由美国Breslow实验室首先将编码 人类 ApoAⅠ的基因分别整合到小鼠及大鼠的基因组内。ApoAⅠ在小鼠和大鼠体内的增强表达选择性地升高了血浆HDL胆固醇(HDL-C)水平。这项观察与人群研究结果一致,表明血浆ApoAⅠ浓度与HDL-C水平正相关,同时也提示可以采用升高血浆A...
大部分人体载脂蛋白基因的染色体定位采用了两种方法:DNA印迹法(Southern blotting);荧光标记原位杂交法(fluorescence insitu hybridization)。DNA印迹法主要是分析从人与老鼠或中国苍鼠体细胞杂交体中提取的DNA。如果人体某种载脂蛋白cDNA或基因DNA探针仅与含有特定人体染色体的体细胞杂交体DNA杂交,且不与...
目前对于基因序列的突变分析国内外多采用直接测序方法,直观又准确。例如,1996年Sakai等报道了对高α脂蛋白血症患者CETP基因内含子10和内含子14片段序列的突变分析。其方法为:采取患者全血根据Kunkel等方法准备基因DNA;CETP基因内含子10的splice donor位点的PCR扩增引物为:5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAG...
...Manual ColdSping Harbor NY:Cold Spring Harbor Lab,1986,332-340 2.琦祖和,转基因动物技术,中华病理学杂志,1993,22:375 3.GordonJW ,Scangos GA,Plotdin DJ,et al Genetic transformation of mouse embryos byo...
LPL基因位于8P22,长约35kb,由10个外显子和9个内含子组成,编码475个氨基酸的蛋白质,包括27个氨基酸残基的信号肽。现已查明外显子1长273kp,编码5'端非翻译区和信号肽区。外显子2~5长度分别为161、180、112和234bp,其中外显子2所编码的Asn 43 糖基化位点为LPL催化活性必需的,外显子4编码脂质结合区。外显子6包含243bp...
基因(Gene), 也称为 遗传因子 , 是指携带有 遗传信息 的 DNA 序列,是控制性状的基本遗传单位。基因通过指导 蛋白质 的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。一般来说,生物体中的每个细胞都含有相同的基因,但并不是每个细胞中的每个基因所携带的遗传信息都会被表达出来。细胞类型的不同只是由于基因表达不同而已。 基因有两个特点,一是...
基因(Gene), 也称为 遗传因子 , 是指携带有 遗传信息 的 DNA 序列,是控制性状的基本遗传单位。基因通过指导 蛋白质 的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。一般来说,生物体中的每个细胞都含有相同的基因,但并不是每个细胞中的每个基因所携带的遗传信息都会被表达出来。细胞类型的不同只是由于基因表达不同而已。 基因有两个特点,一是...
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