原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
(一)基本原理 利用性染色体X或Y的特异性DNA探针的ISHH技术进行胎儿生前(Prenatal)性别的诊断,样品取自于羊水、绒毛或胎儿的血液。近年,科技工作者又成功地进行了胚前(pre-embry-o)或植入前(preimplantation)的ISHH诊断。所谓胚前诊断是在受精卵植入子宫内膜前的4~6细胞期,以显微操纵器(micromanipulator...
...糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。其中氨基聚糖可分为透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫 酸角 质素、肝素和硫酸乙酰肝素等。 真皮纤维化是以胶原为主的细胞外基质成分在真皮中过度 积聚 的结果。它既见于 硬皮病 等皮肤病中,还见于皮肤 创伤 愈合过程中发生的肥厚性瘢痕和 瘢痕疙瘩 中。现将免疫细胞化学技术在上述常见的真皮纤维化性疾病研究中的应用简介如下:
...染色,电镜观察,可见二种不同直径金粒标记。 注意事项:①所有溶液均须经加有微孔滤纸(0.45μm孔,国内外现均有商品提供)的注射器过滤,过滤后直接以注射器冲洗。②滤纸最好用无纤维吸水滤纸。③冲洗在胶金标记技术上是个决定性关键,仅次于抗体血清的纯度。笔者的体会是一般应漂洗3×5min,以注射器喷水漂洗效果优于杯漂洗法,但漂洗水流需与网面平行,勿使水压破坏切片。
原位杂交组织(或细胞)化学技术简称原位杂交(In situhybridization),如上所述,属于固相核酸分子杂交的范畴。但它区别于固相核酸分子杂交中的任何一种核酸分子杂交技术。菌落杂交系细菌裂解释放出DNA,然后进行杂交。Southern印迹杂交法是以鉴定DNA中某一特定的基因片段,而Norhtern印迹杂交法是用以检测某一特定的RNA片段的。它们都只...
...糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。其中氨基聚糖可分为透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫 酸角 质素、肝素和硫酸乙酰肝素等。 真皮纤维化是以胶原为主的细胞外基质成分在真皮中过度 积聚 的结果。它既见于 硬皮病 等皮肤病中,还见于皮肤 创伤 愈合过程中发生的肥厚性瘢痕和 瘢痕疙瘩 中。现将免疫细胞化学技术在上述常见的真皮纤维化性疾病研究中的应用简介如下:
...的研究,包括基因名称、基因在染色体的位置及与相邻基因的距离及其核酸序列的研究。研究基因图的方法包括家系的连锁分析法、体细胞杂交法、重组DNA技术和原位杂交法。果蝇的线形基因图和大肠杆菌、T 4 噬菌体两者的环状基因图都已绘成,目前正致力于 人类 基因图的绘制。人类基因约有5万~10万个,根据第八次国际人类基因定位工作会议,已定位的人类基因总数达1479个。 ...
...糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。其中氨基聚糖可分为透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫 酸角 质素、肝素和硫酸乙酰肝素等。 真皮纤维化是以胶原为主的细胞外基质成分在真皮中过度 积聚 的结果。它既见于 硬皮病 等皮肤病中,还见于皮肤 创伤 愈合过程中发生的肥厚性瘢痕和 瘢痕疙瘩 中。现将免疫细胞化学技术在上述常见的真皮纤维化性疾病研究中的应用简介如下:
神经组织培养是从机体中取出组织或细胞,在模拟机体内生理条件下进行体外培养。免疫细胞化学技术可用于培养的单个细胞或组织片染色,单个细胞可直接固定或冰冻后进行免疫染色,而组织片在固定或冰冻后常需进行切片后染色。由于体外神经组织培养技术能使复杂的神经系统简单化,换而言之,能在神经系统的结构与功能的研究方面提供一个简单的模型,近年来,随着培养技术的发展和与其它科学的...
...理 在恶性的或癌前病变的组织,染色体组含量与结构的畸变在部分病例中与疾病的预后相一致。由于染色体基因的变化可能导致肿瘤的发生与进展,利用一些技术预测这些遗传物质的变化可为恶性肿瘤的检测及了解其进展和预后提供资料。流式细胞计(FCM)和染色体组型,即核型分析(karyothping analyses)等技术曾被用于这个领域的研究。FCM可测定肿瘤细胞DNA的含...
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