利用标记的核酸做探针与转化细胞的DNA进行分子杂交,可以直接筛选和鉴定目的序列克隆。常用的方法是将转化后生长的菌落复印到硝酸纤维膜上,用碱裂菌,菌落释放的DNA就吸附在膜上,再与标记的核酸探针温育杂交,核酸探针就结合在含有目的序列的菌落DNA上而不被洗脱。核酸探针可以用放射性核素标记,结合了放射性核酸探针的菌落集团可用放射性自显影(auroradiograp...
...然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为退火(annealing)。这一术语也用以描述杂交核酸分子的形成(见后)。DNA的复性不仅受温度影响,还受DNA自身特性等其它因素的影响: 温度和时间。一般认为比Tm低25℃左右的温度是复性的最佳条件,越远离此温度,复性速度就越慢。复性时温度下降必须是一缓慢过程,若...
随着 基因工程 技术的发展,新的 核酸 分子杂交 技术不断出现和完善,核酸分子杂交可按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸链游离在溶液中,固体支持物有 硝酸 纤维素滤膜、 尼龙 膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。液相杂交所参加反应的两条核酸链都游离在溶液中。 在固相杂交中,未杂交的游离片段...
随着基因工程研究技术的迅猛发展,新的核酸分子杂交类型和方法在不断涌现和完善。核酸分子杂交可按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。液相杂交所参加反应的两条核酸链都游离在溶液中。 由于固相杂交后,未杂交的游离片段可...
体细胞杂交 (comatic cell hybridization):又称 体细胞 融合,指将两个GT不同的体细胞融合成一个体 细胞 的过程。融合形成的杂种细胞,兼有两个细胞的 染色体 。
是指将待测的DNA变性后点加在 硝酸 纤维素膜(或 尼龙 膜,NC膜)上,用已标记的 探针 进行杂交,洗膜(除去未接合的探针), 放射自显影 ,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于 基因 缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交 (Dot blot)是将被检 标本 点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市...
组织学绪论 组织学研究方法 一般光学显微镜术 几种特殊显微镜的应用 组织化学和细胞化学术 免疫细胞化学术 同位素示踪术 原位杂交术 细胞和细胞化学定量术 电子显微镜术 组织培养术 细胞融合术 组织学与胚胎学学习方法的几个要点 上皮组织 被覆上皮 被覆上皮的类型和结构 上皮组织的特殊结构 腺上皮和腺 外分泌腺和内分泌腺 蛋白质分泌细胞 糖蛋白分泌细胞 类固醇分...
参考书: 1.成令忠,主编.组织学.北京:人民卫生出版 ,1993 2.成令忠,主编.组织学与胚胎学进展续集.北京:人民卫生出版社,1989 3.何泽涌,主编.组织学与胚胎学进展.北京:人民卫生出版社,1987 4.何泽涌,主译.人体发生学一面向临床的胚胎学.北京:人民卫生出版社,1982 5. 中国人胚胎发育时序和畸胎预防. 上海:上海医科大学出版社199...
参考书: 1.成令忠,主编.组织学.北京:人民卫生出版 ,1993 2.成令忠,主编.组织学与胚胎学进展续集.北京:人民卫生出版社,1989 3.何泽涌,主编.组织学与胚胎学进展.北京:人民卫生出版社,1987 4.何泽涌,主译.人体发生学一面向临床的胚胎学.北京:人民卫生出版社,1982 5. 中国人胚胎发育时序和畸胎预防. 上海:上海医科大学出版社199...
参考书: 1.成令忠,主编.组织学.北京:人民卫生出版 ,1993 2.成令忠,主编.组织学与胚胎学进展续集.北京:人民卫生出版社,1989 3.何泽涌,主编.组织学与胚胎学进展.北京:人民卫生出版社,1987 4.何泽涌,主译.人体发生学一面向临床的胚胎学.北京:人民卫生出版社,1982 5. 中国人胚胎发育时序和畸胎预防. 上海:上海医科大学出版社199...
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