... 基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测 人类 遗传性疾病的基因缺陷和一些 传染病 病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来标记探针DNA。近年来,非同位素标记方法发展很快,已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法,是较为成功的...
作为示踪剂及分析试剂的标记化合物,应具有比一般非标记化合物更高的质量要求。标记化合物的质量指标包括:放射性核纯度、放射化学纯度、放射性比活度、生物活性和免疫活性以及标记位置和定量分布情况等。 1.放射性核纯度及其检查方法 (1)放射性核纯芳可用下式表示: 放射性核纯度(%)=所需放射性核素的活度/样品的总放射性活度×100 (2)放射性核纯度的检查方法:每一...
体液中Cl以离子形式存在,几乎全与 Na +平衡增减。测定Cl-的方法有多种。 ⒈ 滴定法 ⑴Molrr法:以K2CrO4为指示剂,用AgNO3 滴定 血清 中Cl-,以过量的Ag+与CrO42-结合出现Ag2CrO4红色沉淀为终点,根据AgNO 3 消耗量计算出 标本 中Cl - 的量。 ⑵Sehales法:以二苯卡巴腙作指示剂,用Hg(NO 3 ) 2 ...
标记好的免疫金探针必须经过纯化处理以后才能用于免疫细胞化学染色。纯化的目的是除去其中未标记的蛋白质,未充分标记的胶体金以及在标记过程中可能形成的各种聚合物。
原位启动标记法(Primed in situ labelling,PRINS),又叫寡核苷酸启动法(Oligonucleotide-priming method)是Koch(1987)首先提出的,其基本原理是将未标记的寡核苷酸探针与细胞或组织中的靶DNA或RNA进行杂交,然后该寡核苷酸探针充当引物的作用,在Kelow多聚合酶的催化作用下,将生物素(或地高辛、...
在材料中引入标记质。可以简化混合物中包含成分的辨别工作。而且使有 标记物 的运动和过程的追踪更加容易,可当作标记物的物质类类型有,铁磁物质。普通的和发光的油漆,有强烈气味的物质,等等。
血清 总 脂质 主要包括FC、 CE 、 PL 和 TG 等。血清总胆质测定除作为脂质 代谢 紊乱及有关疾患的协助诊断外,还可用于血总脂增加的 原发性 胆汁酸 肝硬化 、 肾病综合征 或急慢性 肝炎 以及血总脂减少的重症肝炎、肝硬化等的严重肝实质性损害、恶液质、 甲状腺功能亢进 和 吸收不良综合征 等疾患的协助诊断。 血总脂一般随年龄增加而升高,40岁以上者...
CSF中酶活力测定可反映 中枢神经系统 的病变,因CSF中酶浓度一般不受中枢神经系统之外 疾病 的影响。 ⒈ LDH 及 同工酶 增高见于 癫痫 、 脑肿瘤 、 痴呆 、 脑膜炎 、 脑积水 、 肌萎缩 侧束硬化、 脑血管 性疾病及 脑外伤 等。 ⒉ GOT 增高见于痴呆、癫痫、脑外伤、 小脑病变 、脑肿瘤、 周围神经病 及 多发性硬化 。 ⒊ CPK ( ...
用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果 1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10-7系列稀释的抗原,斑点直径0.25cm, 空气中干燥,80℃多聚甲醛蒸气固定1h,然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥抗联接胶体铁标记物的间接法染色,普鲁士蓝呈色观察。一步法所难检测到的抗原量为10-2~10-3μg,间接法 敏感性至少增...
...7.9,在pH7.4时通过离子键能与抗体IgG(pH5.8~7.3)结合而不影响抗体活性,在此条件下,Seno'对Hale'胶体铁进行了抗体标记,并成功用于免疫细胞化学染色(Seno,et al.1989),抗体标记时,用0.1mol/L碳酸钾将胶体的pH调至7.4按每毫升脱体铁0.2~1mg的蛋白量,将IgG在电磁搅拌下逐滴加入到胶体铁,搅拌5min后,通...
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