目前对于基因序列的突变分析国内外多采用直接测序方法,直观又准确。例如,1996年Sakai等报道了对高α脂蛋白血症患者CETP基因内含子10和内含子14片段序列的突变分析。其方法为:采取患者全血根据Kunkel等方法准备基因DNA;CETP基因内含子10的splice donor位点的PCR扩增引物为:5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAG...
(一) 试剂 (1) 引物 :决定 扩增 的特异性。根据检测的 DNA 不同,选用不同引物,每种病原微生 物都有自己特异的引物。 (2)耐热的DNA 聚合酶 :此酶是从耐热 细菌 中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。 (3)10×PCR 缓冲液 :500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L M...
...成分,此谓细菌的分解代谢。细菌以营养原料及生物氧化产生的能量,合成菌体及相应的代谢产的,此谓合成代谢。 细菌在分解和合成代谢中能产生多种代谢产物,在细菌的鉴定及生化反应中有实际意义。 (一)分解代谢产物的检测 细菌的分解代谢产物因各种细菌具备的酶不完全相同,而有所差异。各代谢产物可通过生化试验的方法检测,通常称为细菌的生化的反应。 1.糖代谢测定 (1)糖发...
人 疱疹 病毒——一种可在接受器官移植的儿科患者中引起严重后果的病毒——可通过聚合酶链反应(PCR)进行监测。 接受器官移植的儿童往往会由于疱疹病毒的存在而预后极差甚至死亡。德克萨斯大学的R. H. Scheuermann及其同事研究了PCR法在定量病毒感染以及区分疾病期和潜伏期中的作用。 研究者们对8种疱疹病毒进行了分析: 单纯疱疹 病毒1和2、 带状疱疹...
目前对于基因序列的突变分析国内外多采用直接测序方法,直观又准确。例如,1996年Sakai等报道了对高α脂蛋白血症患者CETP基因内含子10和内含子14片段序列的突变分析。其方法为:采取患者全血根据Kunkel等方法准备基因DNA;CETP基因内含子10的splice donor位点的PCR扩增引物为:5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAG...
所谓免疫(Immune PCR)就是利用抗体与DNA特异结合来检测抗原,把抗原抗体反应与PCR联合应用而建立的一种抗原检测系统。 在免疫PCR中,一个中介分子同时具有与DNA、抗体分子特异结合的能力。其一端连接DNA(标记物),另一端连接抗原-抗体复合物,形成一个特殊的抗原-抗体-DNA连接物。作为标记物的DNA分子可用PCR的扩增,存在特异的PCR产物应证...
1 民族植物学(Ethnobotany)的含义 民族植物学作为一学科出现是20世纪初,但是民族植物学的概念在19世纪末叶,在美国已被提出,当时它的含义是指在一定的地理区域、一定的种族,为了其生存和发展,必须利用周围环境中的植物, 人类 和些植物形成了一定制约关系,而影响这些关系有种种的因子,其中包括了地理、气候、种族、社会、历史、语言、宗教、民俗等等,因此它...
加端PCR(add-PCR)是使扩增产物的5’-末端加一段DNA顺序的PCR。设计加端PCR的引物时,除与模板配对的那一部分外再加上若干碱基,这样使扩增产物的末端加上额外一段DNA,如加上一个限制酶的识别顺序或特定功能的DNA片段。Stoflet等报道在结构基因前加上噬菌体T 7 的启动子,当然也可用于DNA片段的末端标记或引入特定的点突变。末端可加碱基的数...
石油、煤焦油、页岩油及其分馏产物所致的皮肤病(dermatoses due to petroleum、coal tar、shale oi1、and theirs derivatives)系从业者因从原油开采、分馏产品提取加工及各种产品使用过程中发生的皮肤 黏膜损害 。石油及其分馏产物如汽油、煤油、柴油、各种润滑油、石蜡、沥青等;煤焦油及其分馏产物如轻油、中油...
...紫外线 照射观察荧光的方法(可检出200μg/L尿),还可用分光光度或荧光测定, 薄层层析 或高将近液相 色谱法 对尿 中卟啉 成人进行定量分析。 [参考值] 卟啉定性:阴性。 定量分析: (1)ALA:儿童38.2μmol/L;成人11.4-57.2μmol/24h (2)CP儿童:0-12.nmol/24h;成人75-240nmol/24h (3)PBG...
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