在DNA的一级结构中,四种碱基A,T,C,G远非均匀分布,尽管双螺旋的构型大体相同,但沿着DNA链各处的物理结构不完全相同,各处双螺旋的稳定性也就显示出差别,充分体现了DNA一级结构决定高级结构的原理。其不均一性主要有: 1.反向重复序列(inverted repeats) 又称回文序列(palindrome),它能在DNA或RNA中形成发夹结构。这种回文结...
(一)基本原理 应用DNA探针缺口翻译(nick translation)方法,通过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种:一种是用HRP显示,类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法,利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
DNA 分子 是4种 脱氧核苷 酸经3’→5’ 磷酸二酯 健聚合而成,所以了称为 多核苷酸 (polynucleotide)。DNA的 一级结构 是指4种 核苷酸 的连接及其排列顺序。1953年Watson和Cricd提出了DNA分子双 螺旋结构 模型,其要点是:DNA分子是由2条平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手双螺旋结构(B型DNA)。多种芏酸的方...
renaturation 是恢复原有性质的意思。变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然 构象 的现象。 变性的一种逆转。 蛋白质 或 核酸 的天然构象,在 分子 遭到变性以后,全部或部分恢复。它通常是特指分子 生物学 中一类生物大分子物质,尤指 脱氧核糖核酸 (DNA)和 核糖核酸 (RNA)。指变性的DNA( 单链 )在适当的条件下,两条彼此分开的 多核...
DNA修复 ( DNA repairing)是 细胞 对DNA受损伤后的一种反应,这种反应可能使DNA结构恢复原样,重新能执行它原来的功能;但有时并非能完全消除DNA的损伤,只是使细胞能够耐受这种DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来(如细胞的 癌变 等),但如果细胞不具备这修复功能,就无法对付经常发生的DNA损...
...结构在某些物理或化学因素作用下,其特定的空间结构被破坏,从而导致理化性质改变和生物学活性的丧失,如酶失去催化活力,激素丧失活性称之为蛋白质的变性作用(denaturation)。变性蛋白质只有空间构象的破坏,一般认为蛋白质变性本质是次级键,二硫键的破坏,并不涉及一级结构的变化。 变性蛋白质和天然蛋白质最明显的区别是溶解度降低,同时蛋白质的粘度增加,结晶性破坏...
DNA的复制实际上就是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下,将游离的四种脱氧单核苷酸(dATP,dGTP,dCTP,dTTP,简写为dNTP)聚合成DNA的过程。 这是一个非常复杂的酶促反应,需要许多种酶和蛋白质参与,现分别叙述它们在DNA复制中作用。
1953年,Watson和Crick提出了著名的DNA分子的双螺旋结构模型,揭示了遗传信息是如何储存在DNA分子中,以及遗传性状何以在世代间得以保持。这是生物学发展的重大里程碑。 在DNA双螺旋结构模型建立之前,早在1868年,Miescher已经从脓细胞提取到核酸与蛋白质的复合物,当时称为核素(nuclein)。但核酸在生命活动中的重要地位,却迟至本世纪5...
DNA 作为遗传物质的基本特点就是能够准确地自我复制,而DNA的互补双 螺旋结构 对于维持这类遗传物质的稳定性和复制的准确性都是极为重要的。 (一)DNA复制的方式 从前面的内容可知,DNA是由两条互补的 多核苷酸 链组成的,其中一条链上的 核苷酸 排列顺序可以决定另一条链上的核苷酸顺序。据此推测,在复制过程中,首先DNA双螺旋的两条多核苷酸链之间氢键断裂,...
双螺旋 DNA 进一步扭曲盘绕则形成其三级结构, 超螺旋 是DNA 三级结构 的主要形式。自从1965年Vinograd等人发现 多瘤病毒 的环形DNA的超螺旋以来,现已知道绝大多数 原核生物 都是共价封闭环(covalentlyclosed circle,CCC) 分子 ,这种双螺旋环状分子再度螺旋化成为 超螺旋结构 (superhelix或superco...
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