...细菌培养结果比较有显著性差异(P<0.05)。PCR方法还检出2例上述三项常规检方法均为阴性的Hp感染者。所有细菌培养或银染色阳性的病人,用PCR检测均呈阳性。②PCR对药的物治疗后Hp是否根除的评价:用PCR方法检测了25名十二指肠溃疡病伴...
...蒸馏水稀释,保存于4℃冰箱。2.标本处理:目的是为了暴露梅毒螺旋体的DNA,消除标本对PCR的抑制物。采用下列处理方法。①煮沸法:取10或20μl血清或CSF放入0.5ml微量离心管中,水浴煮10min后在冰浴中冷却,13000g离心10s,上...
...PCR技术以惊人的速度在研究与诊断领域得到应用,限于篇幅所限,在此不一一进行讨论了。本章 重点讨论了PCR技术发展的有关内容,尤为影响PCR的主要因素和PCR的各种反应模式及新进展,以求大家在实际工作中能够注意到这些问题,并有所创新,相信...
...琼脂糖电泳上就可以检测出来,如用更好的方法来检测PCR产物,如放射性同位素,荧光物或酶等掺入到PCR产物中,可进一步提高其灵敏度和适用性。另外,如果采用不同大小标准的DNA进行标记,在电泳时,可同时检测出多种不同的抗原分子。PCR产物的多少与...
...下,进行细胞内杂交,显影或显色。用于DNA或RNA分析。细胞用离心涂片机涂片或组织切片置于载玻片上。4%多聚甲醛(PFA)/PBS固定(固定时间因标本而异10-20分钟,也可用含2%甲醛,0.05%戊二醛,2.5mmol/lCaCl2的...
...HIV感染后数周或数日内常不能检出抗体,95%的受染者在5个月内可测出抗体。但也有感染后3-4年仍不能检出抗体者,此时有必要检测HIV病毒。(四)PCR技术检测HIV病毒1.标本的采集与模板核酸的制备。从怀疑为AIDS和ARC患者以及无症状的...
...,不宜过短或过长)作为引物,在PCR仪中经过30—50个温度循环扩增其核酸片段,使其呈几何级数长,然后取其产生或其酶切片段在琼脂糖上跑电泳,即可判断所得产物是否即企望的基因产物。目前亦已可用这一反应来测知标本中有无Hp的存在,甚至还可进一步...
...加端PCR(add-PCR)是使扩增产物的5’-末端加一段DNA顺序的PCR。设计加端PCR的引物时,除与模板配对的那一部分外再加上若干碱基,这样使扩增产物的末端加上额外一段DNA,如加上一个限制酶的识别顺序或特定功能的DNA片段。...
...超过其他方法,因而有利于确定细菌感染的来源和途径,如检查环境或动物传染源。目前PCR技术用于Hp流行病学研究有:3.2.1 酶切PCR扩增后的DNA产物最早由Langenberg等报告了用Hind Ⅲ限制性内切酶分析Hp全基因的差异,...
...超过其他方法,因而有利于确定细菌感染的来源和途径,如检查环境或动物传染源。目前PCR技术用于Hp流行病学研究有:3.2.1 酶切PCR扩增后的DNA产物最早由Langenberg等报告了用Hind Ⅲ限制性内切酶分析Hp全基因的差异,...
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