...在聚丙烯管中可以对多种含膜板材料进行PCR,而在显微玻片上用组织细胞涂片或切片直接进行DNA扩增的方法就称为玻片PCR(Slide-PCR)。图22-3 锚定PCR原理示意图先将细胞涂片或呈单层细胞,然后用甲醇/醋酸(3:1,V/V)、...
...,吸去液体,30℃干燥后,加蒸馏水25μl溶解, 待检。 2. 引物设计: P1,5′CGACTTTGCCAGCCTGTACC3′ P2,5′AGTCCGTGTCCCCGTAGATG3′ (1)PCR实验体系: 反应体积100μl; 模板...
...三、DNA探针已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。四、聚合酶链式反应(PCR)(一)标本的采集及处理采集的标本包括患者的血液、尿,以及腺体组织等。由全血制备的血沉棕黄层(...
...特异性与PCR 32P探针的Southern杂交法相当。但PCR微孔板夹心杂交法操作简便、快速、避免了同位素标记探针的危害,显色反应类似于临床常规应用的ELISA,适于临床实验室常规应用。(四)PCR-ELISA法本法避免了电泳和杂交的步骤,...
...-AACAACTGACCCCGGTGGCG-3’;P2:5’-ATGGCGCTGAGGCCGCGCTC-3’。特异性扩增ApoE基因第4外显子区含编码112位与158位氨基酸的基因序列(如图19-5)。产物片段292bp。图19-5 PCR扩增产物经HhaⅠ...
...得到的HLA-RFLP可以和传统方法测定的HLA特异性型别相关。80年代末发展起来的PCR(polymerase chain reaction)技术已被用于RFLP分析,即用等位特异限制酶裂解PCR扩增的片段,然后再进行分析,从而大提高了...
...互补的寡核苷酸为引物(CP1/CP2),建立了从胃粘膜活组织标本中检测Hp感染的PCR技术。用该方法检测Hp标准菌株NCTc 11637,NCTC11848及50株从临床病人胃粘膜活组织中分离的Hp菌株均产生450bp的片段,其敏感性为...
...基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。图20-9 cDNA文库的构建三、聚合酶链式反应(PCR)如果已经知道目的基因的序列,就能很方便地用PCR聚合酶链式反应,polymerase chain ...
...近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进,重组DNA操作技术包括的范围不断扩大,DNA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。DNA克隆技术在动脉粥样硬化等疾病的病因...
...近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进,重组DNA操作技术包括的范围不断扩大,DNA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。DNA克隆技术在动脉粥样硬化等疾病的病因...
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