要使ELISA测定得到准确的结果,不论是定性的还是定量的,必须严格按照规定的方法制备试剂和实施测定。主要试剂的制备要点已如前述,其他一般性试剂,如包被缓冲液、洗涤液、标本稀释液、结合物稀释液、底物工作液和酶反应终止液等,配制时不可掉以轻心。缓冲液可于冰箱中短期保存,使用前应观察是否变质。蒸馏水的质量在ELISA中也至关重要,最好使用新鲜重蒸馏的。不合格的蒸馏...
放射免疫分析由于敏感度高、特异性强、精密度高、并可测定小分子量和大分子量物质,所以在医学检验中应用极为广泛,常用于测定各种激素(如甲状腺激素、性激素、胰岛素等)、微量蛋白质、肿瘤标志物(如AFP、CEA、CA-125、CA-199等)和药物(如苯巴比妥、氯丙嗪、庆大霉素等)等。各种检测项目均有试剂盒供应,而且仪器设备并不昂贵,所以在国内被广泛采用。但由于核素...
信号转导过程中往往涉及多种激酶的活化,因而对这些激酶活性的测定可以作为信号转导研究中的一种重要指标。常见激酶活性的测定有PTK、PKC及PI-3K等。均有商品化的试剂盒。检测原理是根据激酶可以催化特定底物发生磷酸化,外源加入 32 γ-ATP,通过分离反应产物后测定放射活性,从标准曲线推算出样品酶的活性。前已提及,PKC从胞质向胞膜的转位是PKC活化的一个重...
一、免疫荧光或免疫酶标技术在肾脏疾病中的应用的意义
...溶液呈碱性,再加5mlPH约为10的NH+-NH3·H2o 缓冲溶液,加铬黑T指示剂,用EDTA标准溶液滴定至溶液呈蓝色. (三)水的总硬度测定 取水样50ml,加入5mlPH=10的NH+-NH3·H2O 缓冲溶液,再加铬黑T指示剂数滴,用0.01ml mol·L-1的EDTA标准溶液滴定至溶液呈蓝色。按下式计算出每升水中CaCO3的含量作为总硬度(单位m...
标题 玻璃 酸酶测定法 附录序号 附录Ⅻ 内容全文 C. 玻璃酸酶测定法 试剂 (1) 醋酸-醋酸钾缓冲液 取醋酸钾14g与冰醋酸20.5ml,加水使成1000ml。 (2) 磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠2.5g、无水磷酸氢二钠1.0g与氯化钠8.2g,加水使成1000ml。 (3) 水解 明胶 取明胶50g,加水1000ml,在121℃加热90分钟,然后冷冻...
所谓“免疫”就是免患疾病的意思。人的机体本身具有排除异物、保卫自己的免疫系统,即是机体内在抗病能力,中医称之为“正气”早在两千多年前《内经》就指出:“真气从之,精神内守,病安从来”。这里所说的“真气”就是机体抵抗病邪的、“正气”,只要体内正气旺盛,纵有许多致病因素(邪气),正气也能抵御(驱出或消灭之)机体就可免于生病。 中医非常强调“正气”在发病学上的主导作...
...原与空肠弯曲菌等存在交叉反应,有必要对Hp特异性抗原进行纯化后使用,大量研究表明Hp尿素酶为一种理想的Hp特异性抗原成分。 我们在国内外首次应用SephadexG200柱从Hp超声波破碎物离心上清中,一次性提纯了Hp尿素酶抗原,SDS—PAGE分析结果表明,所提取的Hp尿素酶抗原中仅含有66000及30000两种蛋白成分,与Hp尿素酶蛋白两种亚基的大小完全相...
自70年代开始,国外应用SPA建立了许多敏感、特异性强、快速和简易的实验方法,并在许多方面的应用中积累了实际应用的材料,现已广泛应用到免疫学及其相关科学如细胞学、细菌学和病毒学等。其可能应用的范围可归纳为以下四个方面: 1.应用于免疫球蛋白的制备和分析 SPA是一种比较理想的提纯和分析免疫球蛋白的试剂。由于SPA与IgG及其某些亚型的Fc段有较强的结合力,可...
1.溶菌酶 用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液,分装成小份并保存于-20℃。每一小份一经使用后便予丢弃。 2.蛋白水解酶 类 贮存液 贮存温度 反应浓度 反应缓冲液 温度 预处理 0.01mol/L Tris(pH7.8) 链霉蛋白酶 a 20mg/ml -20℃(溶于水) 1mg/ml 0.01mol/L EDTA 37℃ 自消化 b 0.5% SDS ...
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