一、荧光现象
... 人乳 中的SIgA，具有双重抗原性（SC和IgA），不能特异进行IgA组织定位，最好采用抗人α-重链抗血清。 （2）SC是糖蛋白，IgA是免疫球蛋白。在组织处理上虽然有人提出用冷冻切片或福尔马林固定胰酶消化的方法，我们的体会用冷酒精直接固定法既简单又方便。 （3）SC和IgA除一部分在细胞内，也可以分布于间质和粘膜表面。为了提高特异性，除了染色前用琼脂扩散...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光，停止能量供给，发光也瞬时停止（一般持续10-7～10-8s）。可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光色素。目前主要常用的荧光色素有以下3种：
抗体产生细胞胞浆内含有相对多的抗原，故采用直接或间接法免疫细胞化学技术可简化步骤，节 省时间，降低成本。为了清除组织间弥散的免疫球蛋白，我们在固定前用PBS浸洗，取得良好的效果。用双标记免疫荧光技术可以在同一张切片上显示出两种不同的抗体产生细胞。 1．组织加工根据研究目的的内窥镜直视下钳取胃、小肠或结肠粘膜。将取得的组织立即放入含4 ℃ ，pH7.2、0.0...
先测定荧光抗体特异性染色与非特异性染色的效价，若二者效价相差较大，则可将荧光抗体稀释至一临界浓度，使特异性染色呈阳性，而使非特异性染色保持阴性，稀释方法和染色效价测定方法相同。
荧光素 是具有光致荧光特性的染料， 荧光染料 种类很多 种类 目前常用于标记 抗体 的荧光素有以下几种。 异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和 酒精 溶剂。有两种 异构体 ，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与 蛋白质 结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，...
荧光素 是具有光致荧光特性的染料， 荧光染料 种类很多 种类 目前常用于标记 抗体 的荧光素有以下几种。 异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和 酒精 溶剂。有两种 异构体 ，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与 蛋白质 结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，...
在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时，要进行双重荧光染色，一般均采用直接法，将两种荧光抗体（如抗A和抗B）以适当比例混合，加在标本上孵育后，按直接法洗去未结合的荧光抗体，抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记，发黄绿色荧光；抗B抗体用TMRITC或RB200标记，发红色荧光，可以明确显示两种抗原的定位。
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