...Guesdon及其同事们(1979)建立的,由于这二种方法都需以生物素标记第一抗体,应用不如ABC法普遍。但用于免疫细胞中免疫球蛋白的显示具有特异性。二者比较,LAB法手续较简便,但灵敏度较低。生物素—抗生物素染色法采用免疫细胞化学染色中各种常用...
...32P]dCTp 1.5×106Bq,dATp 、dGTP和dTTP各200μmol/L。标记反应包括3个步骤:(1)变性:反应管在95℃水浴5min,然后离心;(2)退火:37℃水浴2min;(3)延伸:加入DNA聚合酶i 1u,37℃水浴...
...(1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与LAB法和BRAB法不同的是第一抗体不为标记物所标记,生物素标记的第二抗体与ABC...
....标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)生物素标记终止液:(四)DNA探针标记常用试剂的配制(1)10 ×缺口平移缓冲液...
...酶活性。第三,DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择,如缺口平移法、随机引物法、PCR标记法等,能用于同位素和非同位素标记。(二)cDNA探针cDNA是指互补于mRNA的DNA分子(complementary DNA)。cDNA是由...
...(一)基本原理在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后,科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似,首先利用地高辛修饰核酸探针,与细胞或组织进行...
...translation),利用此反应可在体外对DNA片段进行放射性磷(α-32PdNTP)的标记制成探针(probe),进行核酸的分子杂交实验,是现代分子生物学的一项重要技术(图16-11)。 图16-11 缺刻平移标记DNA探针许多实验证实DNA ...
...min×3。如用生物素标记核酸探针,应用0.3%的H2O2孵育37℃过夜,然后以蛋白酶K溶液(5μg/ml PBS)55℃孵育2h(孵育时间应根据细胞的种类而定),将孵育的载片置于96℃热板上2min,最终以蒸馏水漂洗,空气干燥。在溶液中按...
...基因变异的关系起了很大的作用。但是,由于同位素不稳定和放射性危害,不能常规用于临床或法医检验,用非放射性物质(生物素、荧光素和地高辛等)标记的寡核苷酸探针分析PCR产物以确定核酸序列变异则是一种简便而安全的方法。非放射性标记物质稳定性高,...
...此法标记原理如下图所示:标记的HRP部分催化底物化学发光反应:氨基苯二甲酰肼氨基苯二甲酸+N2+光→X-光片上感光10~20min显定影。光亮子在酚、萘及胺类等增强剂促进下,而使光亮增强。这种方法就是利用特殊的酶底物,氧化后把产生的能量...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。