1．Marsshall 氏法 （1）材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/l pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25～50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等。 （2）方法及步骤： ①抗体的准备：取适...
（1）用4%多聚甲醛（在0.05mol/l 磷酸缓冲液中，pH7.2）在原位固定（4 ℃ ）1h。 （2）用0.05mol/l PBS充分洗涤后，用HRP标记的抗体血清作用18h，再用PBS充分洗涤。 （3）2%戊二醛固定1h，再水洗。 （4）呈色反应，用DAB—H 2 O 2 呈色反应，水洗。 （5）1%锇酸后固定30min～1h，原位用环氧树脂包埋，光镜...
在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各...
在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各...
...）镍网面A（树脂包埋） ①蒸馏水冲10min。 ②10% H 2 O 2 蚀刻10min室温 ③10%正常血清（以0.5mol/l Tris缓冲液pH7.4、含1%BSA和2%Tween20 稀释，简称TBT缓冲液）室温30min。 ④以滤纸吸去多余液体，覆于特异性第一抗体1：500（Tris 缓冲液，pH7.4,含1%BSA和0.1%叠氮钠）4 ℃ ，孵育...
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳。由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳。由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
...-4-甲基香豆素（7-amino-4-methyl coumarin, AMC）260μg溶于二甲亚砜25μl中。 （2）将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sephadex G-50除去游离荧光素。 AMC呈黄色结晶固体，最大吸收波长354nm,最大荧光波长430nm。
（一）cRNA探针的同位素标记 1．标记液（转录标记） 2．转录缓冲液 ※：用地高辛或生物素标记时，用UTP替代。 3．标记终止液 4．标记探针水解液 先用dH 2 O悬浮探针，再加入后两种试剂，轻轻振摇混合，于60℃条件下反应。 5．探针水解时间 注：L O －探针初始长度（kb） L f －探针的终长度（kb） K－0.11kb/min 6．探针水解终止...
...酯化脂肪酸（NEFA），经酶试剂作用生成紫色化合物，其颜色深浅与NEFA含量成正比。 2．试剂组成 代号 种类 组成 浓度贮存 贮存 R1 缓冲液 磷酸缓冲液 MgCl 2 液 去垢剂 0.04mmol/LpH6.9 3mol/L R2 酶/辅酶 乙酰CoA合成酶 抗坏血酸氧化酶 CoA ATP 4-AAP 溶于10ml R1液中 ≥0.3U/ml ≥1.5...
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