...min。在无菌条件,吸出血清,分装(0.05~0.2ml),贮于-40℃以下冰箱,或冻干后贮存于4。C冰箱保存。(六)抗血清质量的评价在免疫期间,不仅各个不同的动物,而且同一动物在不同的时间内抗血清效价、特异性、亲合力等都可能发生变化,因而...
...通过核酸标记技术可将细胞因子cDNA作为基因探钊检测细胞内细胞因子基因组DNA或mRNA。主要有以下几种方法:1.应用同位素(或非同位素)标记的cDNA探针,检测经Northernblot后细胞因子mRNA水平或采用打点杂交法。2.应用...
...-dUTP,可用缺口平移或末端加尾标记法。实验发现生物素可共价连接在嘧啶环的5位上,合成TTP或UTP的类似物。在离体条件下,这种生物素化dUTP可作为大肠杆菌多聚酶I(DNA酶I)的底物掺入带有缺口的DNA或RNA,得到生物素标记的核酸...
...通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒,也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法,是在90年代才开展起来的多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便,在我国...
...3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。(4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆。(5)抗体分子上...
...盒,48℃孵育4h或过夜。次日PBS漂洗,以抗生物素标记FITC抗血清(100μg/ml PBS pH7.2)37℃孵育1h,PBS冲洗,以甘油/PBS溶液封片,荧光显微镜观察。如生物素标记核酸探针的显示系统为过氧化物酶,则应用DAB/H2...
...进行遗传学研究的学科称为体细胞遗传学(somatic genetics)。体外培养细胞可人为控制或改变环境条件,并可建立细胞株,长期保存,进行各种正常和病理研究。与基因定位有关的是体细胞杂交(somatic cell ...
...表达,如肝癌,我们用AFP(肝癌特异启动子)启动肝癌特异性抑制基因HCCS1(或LFIRE)的表达,如在Ad-hTERT-AFP载体上,加入肝癌特异性抑癌基因HCCS1(或LFIRE),则构成Ad-hTERT-AFP-HCCS1(或LFIRE...
...水平上抑制目的基因的表达,达到治疗的目的。反义核酸用于基因治疗发展较快,如反义核酸最佳作用靶点的选择,采用化学修饰方法提高反义核酸在细胞内的稳定性,常用硫(S)修饰,形成硫代反义核酸,为了便于反义核酸导入细胞,反义核酸常只有10-30bp大小...
...水平上抑制目的基因的表达,达到治疗的目的。反义核酸用于基因治疗发展较快,如反义核酸最佳作用靶点的选择,采用化学修饰方法提高反义核酸在细胞内的稳定性,常用硫(S)修饰,形成硫代反义核酸,为了便于反义核酸导入细胞,反义核酸常只有10-30bp大小...
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