原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
...Immunocytochemistry,ICC)所应用的抗体既有Fab段,又有Fc段。由于抗体的这一特性可在ISHH和ICC抗体孵育时将检测核酸的抗地高辛抗体Fab段与检测蛋白、多肽的兔抗血清混合在一起,一同孵育切片,这样可明显缩短ISHH和ICC结合法的实验周期,同时还可以减少实验过程中对ICC检测的蛋白、多肽的损害,使结合法易成功。为什么两种抗体可同时混...
核酸 指由许多 核苷酸 聚合而成的生物大分子 化合物 ,为生命的最基本物质之一。最早由米歇尔于1868年在 脓细胞 中发现和分离出来。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与 蛋白质 结合形成核 蛋白 。不同的核酸,其 化学 组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同,核酸可分为 核糖核酸 ,简称RNA和 脱氧核糖核酸 ,简称DNA。D...
原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。ISHH与IHC结合法可以在相邻切片上分别进行ISHH和IHC染色,也可先后在同一切片上进行ISHH和IHC染色。前者可使I...
原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
...RNA探针,将其溶于适量的灭菌双蒸水,用紫外分光亮度计测探针的光密度(详第十九章 ),其最佳工作浓度为2μg/ml。 切片的制作、预处理、预杂交、杂交和杂交后冲洗的方法同概述中基本方法一节 。 光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序: (1)石蜡切片脱蜡入水后,置0.1mol/l PBS pH7.2冲洗5min;冰冻切片直接入PBS冲洗5min。 (2)0.1m...
原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。ISHH与IHC结合法可以在相邻切片上分别进行ISHH和IHC染色,也可先后在同一切片上进行ISHH和IHC染色。前者可使I...
核酸 是由 核苷酸 聚合而成的 高分子化合物 ,是所有 生物 遗传信息 的 携带者 。根据核苷酸 分子 中 戊糖 的类型,将核酸分为 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )两大类。 核苷酸由 磷酸基 、戊糖和 含氮碱基 组成, 碱基 包括嘌呤和 嘧啶 两大类。DNA一般含A、C、G、T四种碱基,RNA含A、C、G、U四种碱基。 四种核苷酸按...
核酸 是生物体内的 高分子化合物 ,包括 DNA 和 RNA 两大类。 一、元素组成 组成核酸的元素有C、H、O、N、P等,与 蛋白质 比较,其组成上有两个特点:一是核酸一般不含元素S,二是核酸中P元素的含量较多并且恒定,约占9~10%。因此,核酸定量测定的经典方法,是以测定P含量来代表核酸量。 二、 化学 组成与基本单位 核酸经水解可得到很多 核苷酸 ,因...
...(6)PBS冲洗2×3min。 (7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L 三乙醇胺配)10min。 (8)2×SSC冲洗10min。 (9)杂交:如是cDNA探针用前需进行变性处理,载片法时将切片在空气中晾干,加含探针的杂交液10μl于切片上,盖上22×22mm的硅化盖片或相当大小看蜡膜, 3 H标记探针每10μl杂交液含1×10 5 cpm探针, 32 P...
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