...特异性。⒉灵敏度 杂交技术用同位素或酶标记探针,PCR反复扩增20-30次都是提高灵敏度的手段。二次PCR、PCR与Southern blot合用都是典型的例子。⒊操作简单 杂交技术因操作复杂且费时(需1-2天以上出结果),在临床实验室难以...
...特异性。⒉灵敏度 杂交技术用同位素或酶标记探针,PCR反复扩增20-30次都是提高灵敏度的手段。二次PCR、PCR与Southern blot合用都是典型的例子。⒊操作简单 杂交技术因操作复杂且费时(需1-2天以上出结果),在临床实验室难以...
...聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)技术已经用于Hp的诊断,该技术的敏感性比寡核苷酸探针增加了100倍,可以检出少至100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的部分序列已经测出,为PCR特异性...
...数周后出现,经固定和HE染色后可观察到巨细胞,核内有内包涵体,核周晕圈及嗜酸性胞浆内包涵体,很象“猫头鹰眼”(owl′s eye)亦可用单克隆或多克隆抗体的荧光染色等方法检查。二、血清抗体检测最常用的有补体结合试验(CF)、间接免疫荧光试验(...
...吸干后滴加蛋白酶K(25μg/ml,Sigma)37℃15min,再用4%多聚甲醛室温固定20min,PBS冲去多聚甲醛,晾干后按上述方法进行原位杂交和杂交后冲洗。三、原位启动标记法原位启动标记法(Primed in situ ...
...直接分析法,PCR产物RFLP分析法,等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交法等等,其中最多用且简单的方法有PCR产物直接分析法和PCR产物RFLP分析法。PCR产物直接分析法,是采用合适的引物,通过多次扩增,获得靶基因序列扩增片段,直接...
...标记的探针杂交,再与包被在葡聚糖珠上的另一互补寡核苷酸(与标记探针互补的位置不同)杂交、检测。该方法同一般杂交检测技术相比,特异性要高出许多。TAS主要特点是扩增效率极高,由于拷贝数是以10指数递增,只有6个循环,靶序列即能达到2×106个...
...优点。四、基因诊断(一)用PCR分型检测单纯疱疹病毒PCR是一种敏感性高,特异性强的快速检测方法,标本中含有1fg HSV-DNA就可以检出,其在HSV感染的诊断研究中发展较快,且分型检测HSV是发展的趋势。1、标本采集和处理(1)标本采集①...
...当基因的突变部位和性质已完全明了时,可以合成等基因特异的寡核苷酸探针(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素标记进行诊断。探针通常为长20bp左右的核苷酸。用于探测点突变时一般需要合成两...
...通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒,也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法,是在90年代才开展起来的多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便,在我国...
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