...、基因组基因探针及DNA探针等。其中cDNA探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northernblot,而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化,以cDNA探针为例主要包括:①质粒DNA的提取;②靶DNA...
...、基因组基因探针及DNA探针等。其中cDNA探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northernblot,而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化,以cDNA探针为例主要包括:①质粒DNA的提取;②靶DNA...
...15~45min 。(11)杂交:将载片上过量的甲酰胺液倾去,加20μl杂交混合液(含放射性同位素标记的探针量为5×103~106cpm/每张载片)。覆以硅化的盖玻片,置于盛有少量5×SSC的硬塑料盒内以保持湿度,42℃孵育12~18h。为...
...、特异性均可达99%;或应用PCR对EHEC DNA序列分析,发现其溶血素AB基因为EHEC特有,其特异性强,敏感快速,3~4h可出结果。其他尚有对SLT1、SLT2两对寡核苷酸引物同时扩增的多重PCR法,但尚未在临床广泛应用。基因检测可...
...灵敏度。(二)PCR/SSO技术此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列...
...DNA片段均参入了标记物,用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好,简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度,可以大量制备。此法有普遍应用价值。标记方法如下:待标DNA模板1ng,50mmol/L KCl, 10mmol/L ...
...用探针作牙齿检查容易对牙齿造成一定损害,有鉴于此,日本学校牙科医疗学会不久前作出决定,医生在给学生作牙齿检查时不再使用探针。 是由细菌感染所致,近来牙科医学正在大力研究牙釉质再生的问题。在龋齿早期,如果进行适当的指导,选择合适的牙刷,用...
...用探针作牙齿检查容易对牙齿造成一定损害,有鉴于此,日本学校牙科医疗学会不久前作出决定,医生在给学生作牙齿检查时不再使用探针。 是由细菌感染所致,近来牙科医学正在大力研究牙釉质再生的问题。在龋齿早期,如果进行适当的指导,选择合适的牙刷,用...
...RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的...
...1.AP显色体系BCI –OH+NBT→紫色↓ASO:等位基因特异的寡核苷酸,BCIP:5溴-4氯-3吲哚磷酸,NBT:四氮唑蓝,Pi:磷酸。2.HRP显色体系HRP + H2O2[HRP·H2O2]ODA –NH2 +[HRP ·H2O...
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