...一根针的神奇技术。据美国华尔街分析家预言:“在生物技术市场中,下一个突破和具有吸引力的是基因探针”。它的巨大的开发潜力和经济效益,已引起人们的重视。目前基因检测方法中以同位素标记(32P、35S等)DNA探针灵敏度最高,但由于放射性污染、...
...一根针的神奇技术。据美国华尔街分析家预言:“在生物技术市场中,下一个突破和具有吸引力的是基因探针”。它的巨大的开发潜力和经济效益,已引起人们的重视。目前基因检测方法中以同位素标记(32P、35S等)DNA探针灵敏度最高,但由于放射性污染、...
...不变。转移结束后,经过80℃烘烤的DNA,将原位地固定于膜上。图13-6 Southern印迹杂交示意图当含有特定基因片段已原位转移到膜上后,即可与同位素标记了的探针进行杂交,并将杂交的信号显示出来。杂交通常在塑料袋中进行,袋内放置上述杂交...
...特异性。⒉灵敏度 杂交技术用同位素或酶标记探针,PCR反复扩增20-30次都是提高灵敏度的手段。二次PCR、PCR与Southern blot合用都是典型的例子。⒊操作简单 杂交技术因操作复杂且费时(需1-2天以上出结果),在临床实验室难以...
...同位素标记探针的危害,显色反应类似于临床常规应用的ELISA,适于临床实验室常规应用。(四)PCR-ELISA法本法避免了电泳和杂交的步骤,适于常规ELISA记数仪检测。因为5'端修饰后仍可进行常规PCR扩增特异靶序列。因此,可以通过修饰一个...
...利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交...
...水浴5min。反应完成,加入酵母tRNA10μg。分别测定参入和游离放射性计数,参入率为97.4%。标记DNA探针经醋酸钠酒精沉淀回收。将沉淀溶于10mmol/l Tris—HCl 、EDTA(pH8.0)100μl。用PCR方法标记的...
...免疫细胞化学在神经科学中的应用已为我们开辟了一个新的研究领域,它确定在机体中除传统的胆碱能神经和肾上腺素能神经以外还存在第三上分枝—非肾上腺素能非胆碱能神经(non—adrener-gic non –cholinergic nerves, ...
...来源生物DNA的复性速率,并可建立序列复杂度与动力学复杂度间的关系。60年代中期Nygaard 等的研究为应用标记DNA或RNA探针检测固定在硝酸纤维素(NC)膜上的DNA序列奠定了基础。如Brown等应用这一技术评估了爪蟾rRNA基因的...
...特异性。⒉灵敏度 杂交技术用同位素或酶标记探针,PCR反复扩增20-30次都是提高灵敏度的手段。二次PCR、PCR与Southern blot合用都是典型的例子。⒊操作简单 杂交技术因操作复杂且费时(需1-2天以上出结果),在临床实验室难以...
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