... 3．0.06% Pronase 试剂：Pronase 0.06g 0.05mol/L TB(pH7.5) 100ml 配制方法：同前。 在免疫细胞化学染色中，有时经Formalin过度固定的标本，常会产生过量的醛基，遮盖抗原，影响一抗与抗原的结合。用蛋白酶溶液消化，可起到暴露抗原部分的作用。消化时间应根据不同组织而异，总之，在保持组织形态不被破坏的前提下，...
自1966年Crabbe首次应用免疫荧光技术进行胃粘膜抗体产生细胞研究以来,随着临床上纤维和电子内窥镜普遍应用,能通过活检取得新鲜组织标本,取材方便,材源丰富,为深入开展免疫细胞化学和组织化学技术对消化道疾病的研究起了重大的推动作用。消化道直接与各种口服抗原接触，是局部粘膜免疫反应场所和中枢器官，也是炎症、 溃疡 、感染和肿瘤等病变的好发部位。用免疫细胞化学...
免疫金银技术（Immunogold—sliver Technique）是在免疫金基础上发展的新兴的先进的免疫细胞化学检测技术，它比免疫荧光，免疫酶标技术有许多独特的优点。 1．制备方法简单，易行。 2．标记简单 抗体、凝集素、酶、SPA、激素等很容易通过物理吸附作用与胶体金颗粒相结合形成稳定的金标复合物。由于在标记过程中不需要经过任何化学方法交联，抗体的生物...
早在一个世纪以前，化学家就对胶体金进行了研究，当时只是研究它的结构和金属性质。在1939年Kausche和Ruska把 烟草 花叶 病毒吸附到金颗粒上在电子显微镜下观察见金离子呈高电子密度。然而胶体金技术作为标记物应用于免疫组织化学研究是在1971年，Faulk 和Taylor首先将兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面...
凝集素的特性及标记原理详见第五章 ，近年来，凝集素电镜标记技术应用日益广泛，且获得较为满意的效果。凝集素电镜标记技术方法较多，常用的有凝集素—酶（常用为HRP）、凝集素—生物素—酶电镜标记技术。现将凝集素—酶电镜标记技术（包埋前染色）简介如下（Sterit 和Kreatzberg,1987）。 （1）固定：常用为PLP或多聚甲醛—戊二醛固定液。如为取脑组织，...
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及...
酶免疫测定 (enzyme immunoassay,EIA)，是将酶催化作用的高效性与 抗原抗体反应 的特异性相结合的一种微量分析技术。 酶标记 抗原抗体 后形成的酶标记物，既保留 抗原 或 抗体 的 免疫活性 ，又保留酶的 催化 活性。当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时，可 形成酶 标记 抗原抗体复合物 。利用 复合物 上标记的酶催化 底物 ...
从广义上说，任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术，不论是经典的比色法、容量法，还是现代的仪器分析技术都可用来测定酶活性浓度，但从历史和发展来看，主要还是使用分光亮度法和量气法。
...eno,etal, 1983,Murakami， et al 1986）。1989年日本学者Seno等在抗体分子上标记了胶体铁，将胶体铁引入免疫细胞化学技术（Seno,et al. 1989）。杨守京等在胶体的制备方法及其标记物的纯化等方面做了改进，成功地用于 流行性出血热 病毒抗原的检测（杨守京，等，1992）。该方法具有较高的特异性与敏感性，背景染色干净...
从理论上讲，用细胞化学方法能显示的酶，均可用于标记抗体，进行ICC染色，但实际上在ICC中所能用的酶并不多。现将常用的几种酶列于表4-1，供选用时参考。 表4-1 免疫细胞化学常用的酶 名 称 分 子 量 内 源 性 商 品 Horseeradish peroxidase(E.C.1,11,1,7) 40～45KD + 有 Alkaline phosphat...
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