利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），这类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
（1）取0.01%HAuCl 4 上水溶液100ml，加热至沸腾。 （2）加入40μl 195 Au。 （3）迅速加入4ml1% 柠檬 酸三钠水溶液，5～7min出现透明的橙红色。 （4）其含量为I×10 6 脉冲数/min。 （八）微波制备液体金方法。
胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带...
免疫原性物质进入机体后能否诱导产生免疫应答，除上述化学基础外，尚受宿主因素的影响，而且是更要的因素。 （一）异种性 在免疫功能正常条件下，只有异种或同种异体的免疫原性物质才能诱导宿主的正免疫应答，即只有“非已”抗原才能引起正免疫应答。这是由于免疫系统在个体发育过程中，对“自己”抗原产生耐受，不能识别，而对“非已”抗原则能够识别所致。因此抗原来源与宿主种系关系...
从不同组织细胞或血细胞中提取DNA是进行基因诊断的先决条件。制备DNA的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净，又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取DNA的反应体系中，SDS是离子型表面活性剂，主要作用是：（1）溶解膜蛋白而不破坏细胞膜；（2）解聚细胞中的核蛋白；（3）与蛋白质结合，使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将...
核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备： （1）直接分离基因核酸：即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。 （2）化学合成基因核酸：即以单核苷酸为原料，以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚，分子量较小的寡核苷核。 （3）酶促合成核酸：在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板，利用逆转录酶合成单链cDNA，再以...
...否被吸附在滤器中，然后上述结合物经过该微孔滤过器过滤到一个无菌瓶中。 ③加入叠氮钠，浓度1：1000，保存于4℃C备用。 2．抗凝集素抗体的制备 抗凝集素抗体的制备法与一般免疫血清制备大致相同（见第二章 ）。所不同的是：①凝集素具有较强的毒性，易使被免疫动物发病或甚至死亡。解决的方法是经处理使凝集素变性，从而减低其毒性，但同时要保证其抗原性不受或少受破坏。②...
（1）胶体金液的制备，应用枸椽酸三钠还原法（见第五章 ）。 （2）待标记蛋白质和金溶液的准备，同前。注意点是用0.2mol/l K 2 CO 3 将金溶液pH调至5.9～6.2之间。 （3）确定胶体金与蛋白A的结合用量比例。取一系列盛有0.1ml胶体金液的小 玻璃 管，分别加入不同量的蛋白A，5min后，再各加0.25ml 10%的NaCl。如加入的蛋白A浓...
壳聚糖的制备甲壳素经脱乙酰化反应后便得到壳聚糖。常见的制备法有化学法和酶法。一般情况下，影响脱乙酰化程度的主要因素有原料和种类（晶型）、甲壳素的制备方法、甲壳素颗粒的大小和密度、碱液的浓度、反应的温度和时间等。衡量壳聚糖产品性能的主要指标是脱乙酰化度和分子量（或黏度）等。一般提高反应温度、碱液浓度和延长反应时间等均可提高脱乙酰化度，但这样会伴随有甲壳素主链的...
鲜姜提取物的制备方法包括将鲜姜榨汁，在每千克鲜姜汁中加入固体试剂10～80克，组成以鲜姜汁为液相、以固体试剂为固相的液－固萃取体系，在10～80℃对鲜姜汁进行萃取2～20小时，沉淀，分离沉淀物，干燥，即可获得具有鲜姜天然活性和天然风味的鲜姜提取物（挥发油和姜辣素混合物）。所用固相试剂是淀粉，糊精，纤维素等。该方法工艺和设备简单，同时完成鲜姜复杂活性成分的提取...
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