（一）特异性高：首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymeraseI的Klenow大片段，其酶活性在90℃会变性失活，需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段，同时引物是在37℃延伸（聚合）易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差，1988年Saiki等从 温泉水 中分离到的水生嗜热杆菌中提取的热稳定的Taq DNA聚合酶，在...
PCR温度循环至关重要，PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来，现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间，扩增仪经过几代的发展，不断采用新技术，并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。 为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备，现将部分国内外PCR扩增仪列表如下...
不对称PCR的基本原理是采用不等量的一对引物产生大量的单链DNA（ss-DNA）。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物；其最佳比例一般为1：50～1：100，关键是限制引物的绝对量。限制性引物太多太少，均不利于制备ss-DNA。也可用普通PCR制备靶DNA双链DNA（ds-DNA），再以ds-DNA为模板，只用其中一种过量引物进行单引物PCR制备ss-...
近几年来，在PCR基础上完善和发展起来的多种基因变异检测方法是基因分析和检测的一次技术革命。其中日本学者创建的PCR-SSCP（Single-Strand ConformationPolymorphism anal－ysis of PCR products）格外重要。它是指单链DNA分子在变性PAGE中电泳迁移率随其构象的改变而改变的性质。单链DNA分子的构...
临床生物化学是 化学 、生物化学与临床医学的结合，目前已经发展成为一门成熟的独立学科。临床生物化学有其独特的研究领域、性质和作用，是一门理论和实践性较强的、边缘性的应用学科，以化学和医学知识为主要基础。广义上讲，临床生物化学是研究器官、组织人体体液的化学组成和进行着的生物化学过程，以及 疾病 、药物对这些过程的影响，为 疾病诊断 、病情监测、药物疗效、预后判...
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法，主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成：即在高温（95℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板；而后在低温（37～55℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；在Taq酶的最适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿...
...型生物制剂等。此外，造血干细胞移植和基因治疗研究在近年来成为热点。值得关注的是，近两年开展的一系列关于新型生物制剂、基因治疗的研究，在给治疗领域带来希望的同时，一些不尽理想甚至失败的治疗结果，其深层次的原因值得医学界深入探讨。 ▲基因疗法可能背了“黑锅” 被寄予很大希望的基因疗法在去年夏天因为一名妇女的死亡而蒙上阴影。于是，美国食品药品管理局（FDA）下令暂...
...始有许多研究单位进行了用纳米技术改造中药的尝试。由于纳米技术的使用使得纳米中药至少在药物被人体吸收的生物利用度方面有很大改进，所以还是非常有应用前景的。随着基础研究工作的不断积累，纳米中药的专利申请将是今后中药领域的高科技热点领域之一。 从复方中药和植物有效部位的发明专利申请分布来看，复方中药的发明仍占居主要部分，越来越多的国内中药研究机构开始进行植物有效部...
...－心理－社会医学模式相适应，但中药的成分复杂，限制了中药研究的快速发展。随着对多糖生物功能认识的深入，多糖生物学研究成了国际争夺生物化学研究领域的制高点，以多糖为重点的糖工程研究可能是继蛋白质工程、基因工程后生物化学和分子生物学领域中的科学前沿。因此，作为中药主要有效成分之一的多糖研究，可能为中药研究带来一个全新的时代———多糖生命科学时代。 多糖生物功能的...
用于PCR的标准缓冲液见PCR操作范例。于72℃时，反应体系的pH值将下降1个单位，接近于7.2。二价阳离子的存在至关重要，影响PCR的特异性和产量。实验表明，Mg 2+ 优于Mn 2+ ，而Ca 2+ 无任何作用。 1．Mg 2+ 浓度Mg 2+ 的最佳浓度为1.5mmol/L(当各种dNTP浓度为200mmol/L时)，但并非对任何一种模板与引物的结合都...
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