以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆，在理论上是很简捷的，即用一种限制酶切割质粒DNA，然后在体外与外源，DNA（如干扰素基因，生长激素基因）相连接，再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌，以鉴定重组DNA。 通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等，噬菌载体有M13噬菌体载体等。 图24-1 质粒载体的定向克隆
DNA 分子 是4种 脱氧核苷 酸经3’→5’ 磷酸二酯 健聚合而成，所以了称为 多核苷酸 （polynucleotide）。DNA的 一级结构 是指4种 核苷酸 的连接及其排列顺序。1953年Watson和Cricd提出了DNA分子双 螺旋结构 模型，其要点是：DNA分子是由2条平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手双螺旋结构（B型DNA）。多种芏酸的方...
单链DNA （single－stranded DNA）大部分 DNA 以双螺旋结构存在，但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、 碱基 反应性质等方面都和双链DNA不同。某些 噬菌体 粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
单链DNA （single－stranded DNA）大部分 DNA 以双螺旋结构存在，但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、 碱基 反应性质等方面都和双链DNA不同。某些 噬菌体 粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体...
目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的，因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA，一个细胞只接受一个重组DNA分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体（recombinant）。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆，所以筛选(dcree...
法国、比利时及美国科学家最近联合破译了促使酸奶形成的嗜热链球菌的基因序列。科学家认为，这一成果有助于研究细菌如何演变成对健康无任何损害的“良菌”。 奶制品一般在两种细菌的共同作用下发酵，最终形成酸奶。两种细菌中一种叫嗜热链球菌，一种名为保加利亚乳杆菌。它们在酸奶形成后仍然大量存活，因此肯定会被酸奶食用者吃进嘴中。 法国国家农艺研究所日前发布公告称，链球菌属的...
闭环DNA （closed circular DNA）没有断口的双链环状 DNA ，亦称为 超螺旋DNA 。由于具有螺旋结构的双链各自闭合，结果使整个DNA分子进一步旋曲而形成三级结构。另外如果一条或二条链的不同部位上产生一个断口，就会成为无旋曲的开环DNA分子。从细胞中提取出来的 质粒 或 病毒 DNA都含有闭环和开环这二种分子。可根据两者与 色素 结合能...
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