...原位杂交免疫细胞化学技术存在的难点之一是实验手续繁琐,实验周期长。国外Liesi等(1986)和国内学者何彬等应用光敏生物素-链亲合素(Biotin-streptavidin)胶体金系统进行原位杂交,得到了快速满意的结果,全部实验可在数...
...在大量正常细胞中难以查出。近年来由于分子生物学技术的广泛应用,且由于获得了Ig片段的特异基因克隆及TCR各链的基因克隆,在此基础上发展了应用Ig基因重排作为B细胞的特异标记,诊断B细胞来源的白血病的和应用TCR基因重排为T细胞特异标志诊断T...
...dTTP标记,因mRNA的多聚(A)尾而影响杂交特异性。寡核苷酸探针多用于核酸“点”突变检测,该探针可用核酸合成仪人工合成。克隆探针一般较长,特异性图18-5 DNA随机引物标记法好,标记量大,杂交检出信号强。合成探针长度短,一般在20-50...
...期间核DNA的杂交可研究特定序列在染色质内的功能排布;与细胞RNA的杂交可精确分析任何一种RNA在细胞中和组织中的分布。此外,原位杂交还是显示细胞亚群分布和动向及病原微生物存在方式和部位的一种重要技术。用于原位杂交的探针可以是单链或双链...
...聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)用于Hp研究创造了条件。本文就近年有关PCR在Hp研究中的应用作一综述。1 PCR原理PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术,有关它的原理许多文献已有详细...
...结缔组织生长因子(CTGF)是介导转化生长因子-β(TGF-β)下游事件的候选因子之一,但是其在TGF-β致纤维化特性方面的作用以及在肾小管间质纤维化中的作用尚未阐明。 日本京都大学医学研究院医学和临床科学部的Yokoi H及其同事应用...
...手段是无法进行的,临床上已可应用的例子有白血病残留细胞的定量(包括慢粒和急粒),肺癌中P53及Rb等抗癌基因的失活,神经质瘤N-myc基因的激活和表达。通过原位杂交观察特定癌基因及抗转移基因的植入和反义寡核苷酸对强表达癌基因的阻断均已成为近代...
...聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)用于Hp研究创造了条件。本文就近年有关PCR在Hp研究中的应用作一综述。1 PCR原理PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术,有关它的原理许多文献已有详细...
...、基因组基因探针及DNA探针等。其中cDNA探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northernblot,而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化,以cDNA探针为例主要包括:①质粒DNA的提取;②靶DNA...
...、基因组基因探针及DNA探针等。其中cDNA探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northernblot,而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化,以cDNA探针为例主要包括:①质粒DNA的提取;②靶DNA...
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