抗原和抗体是免疫学检验的两大重要因素,也是整个免疫反应的基本条件。抗原的纯化是制备特异性抗的先决条件,制得的抗体可用于纯化抗原和检测抗原。抗体有单克隆和多克隆两类。 单克隆抗体用杂交瘤技术制备(详见第十一章),多克隆抗体存在于免疫动物抗血清中。近年来又出现了基因工程抗体(单链抗体)。本章仅叙述抗原纯化和多克隆抗血清制备技术。
细胞在其表面以能被T细胞受体(TcR)特异性识别的方式表达抗原的过程称为抗原呈递。APC以MHC-Ⅱ分子限制的方式将抗原递给辅助性T细胞(TH);各种靶细胞心以MHC-Ⅰ限制的方式将抗原呈递给细胞毒性T细胞(TC)。APC的抗原呈递作用是一个涉及抗原摄取、处理与呈递的复杂过程。各类APC呈递抗原的机制不尽相同,本章主要以巨噬细胞对非已抗原的呈递为例叙述。
胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、 枸橼 酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的胶体金溶液。
(一)胶体金的结构 胶体金(colloidalgold)也称金溶胶(goldsol),是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC1 2 - ),外层离子层H + 则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。 胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,...
抗原免疫动物产生的抗体是血清γ-球蛋白的一部分。抗体的理化性质及结构与γ-球蛋白相近似。γ-球蛋白是一组结构相似,但又有差异的蛋白质,通称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig),按其结构和免疫化学性质的差异,又可分为五类,分别称为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差...
1.处方的筛选制备口腔速崩片的关键在于寻找合适的辅料,特别对辅料的崩解性能要求较高,一般运用的崩解剂有: 交联羧甲基纤维素钠(CCNa) ,微晶纤维素(MCC) ,低取代羟丙基纤维素(L2HPC) 及泡腾剂等。矫味剂有:甘露醇、蛋 白糖 、阿司帕坦、蔗糖、 薄荷 脑、香精等。1.1 崩解剂的筛选1.1.1 崩解时限测定方法 根据国家食品药品监督管理局药品审评...
亚硫酸氢钠 穿心莲 内酯的制备 1 取穿心莲内酯100g, 加95%乙醇1500L加热溶解。 2 取1mol/L的Na2so4 400ml, 加2%H2SO4 480ml混合,加水至800ml。 3 将穿心莲内酯溶液倒入(2)液中,摇匀,加热回流30’后,加2%H2SO4使PH6-7, 回收乙醇至无醇味,用等体积氯仿提取3次,分出水层,并蒸出水至小体积。加醇...
用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原,用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1.免疫荧光技术 免疫荧光技术(immunofluorescencetechni)是用化学方法使荧光素标记的抗体(或抗原)与组织或细胞中的相应抗原(或抗体)结合,进行定性...
(一)抗原及其用量的选择 由于Ab2是针对Ab2Id的抗体,因而制备Ab2时应选择适当的Ab1作为免疫原。所用抗原的用量依照给予抗原的种类、次数、途径以受体动物的耐受性而有所不同。一般来说,当受体动物为小鼠时,常用Ab1最为50-200μg;若受体动物为家兔时,使用的Ab1量可达100-200μg。 (二)免疫动物的选择 抗独特型抗体可在自身体内、同类系、同...
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