从广义上说,任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术,不论是经典的比色法、容量法,还是现代的仪器分析技术都可用来测定酶活性浓度,但从历史和发展来看,主要还是使用分光亮度法和量气法。
引言中已强调了仅在一定条件下酶反应速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么?这些条件之间有无主次关系?如何选择合适的测定条件?这些都是实验室工作者在设计或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。 首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下: 式中Kp可看成为ES的解离常数.Michaclis和Menten通过推导...
所谓“ 免疫 ”就是免患 疾病 的意思。人的机体本身具有排除异物、保卫自己的 免疫系统 ,即是机体内在抗病能力, 中医 称之为“ 正气 ”早在两千多年前《 内经 》就指出:“ 真气 从之,精神内守,病安从来”。这里所说的“真气”就是机体抵抗 病邪 的、“正气”,只要体内正气旺盛,纵有许多致病因素( 邪气 ),正气也能抵御(驱出或消灭之)机体就可免于生病。 中...
检测体液免疫功能的另一种方法是定量测定正常人体内的几种常见的抗体水平。常见的抗体通常是指嗜异性凝集素、抗溶血素O抗体以及 麻疹 病毒、 脊髓灰质炎 病毒的抗体。 在严重 免疫缺陷 病人缺乏上述抗体,常见抗体的缺损可验证或支持免疫蛋白测定的结果。然而对于比较复杂的免疫缺陷,由于这类抗体主要反映过去的免疫应答能力,此外这种初次应答能力持续期短,易于消退,所以对新...
放射免疫分析由于敏感度高、特异性强、精密度高、并可测定小分子量和大分子量物质,所以在医学检验中应用极为广泛,常用于测定各种激素(如甲状腺激素、性激素、胰岛素等)、微量蛋白质、肿瘤标志物(如AFP、CEA、CA-125、CA-199等)和药物(如苯巴比妥、氯丙嗪、庆大霉素等)等。各种检测项目均有试剂盒供应,而且仪器设备并不昂贵,所以在国内被广泛采用。但由于核素...
用 免疫学 方法测酶质量和经典的测 酶活性 方法相比,不仅灵敏度高,并可能测定一些以前不易测定的酶。但更为有意义的是:有可能为临床上的应用提供新的资料和信息。从 疾病 论断的角度来看,至少提供下列三个的可能性: (一)酶活性和酶质量变化的不平行 这二者的变化在不少情况下是互相平行的,但在一些情况下可以出现不一致。早在1987年Robert就提出可以用免疫学方...
CSF中酶活力测定可反映 中枢神经系统 的病变,因CSF中酶浓度一般不受中枢神经系统之外 疾病 的影响。 ⒈ LDH 及 同工酶 增高见于 癫痫 、 脑肿瘤 、 痴呆 、 脑膜炎 、 脑积水 、 肌萎缩 侧束硬化、 脑血管 性疾病及 脑外伤 等。 ⒉ GOT 增高见于痴呆、癫痫、脑外伤、 小脑病变 、脑肿瘤、 周围神经病 及 多发性硬化 。 ⒊ CPK ( ...
...方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。 1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,即使同样的实验药物和程序,在不同的时间制备的酶标抗体中,多聚体的数量亦不相同。多聚体较单体含酶量多,与组织的非特异吸附增强,使方...
酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附试验 (Enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA) 利用抗原抗体之间专一性键结之特性,对检体进行检测;由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之 抗原 或 抗体 仍可具有免疫活性,因此设计其键结机制后,配合酵素呈色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用呈色之深浅进行定量分析。 历...
酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附试验 (Enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA) 利用抗原抗体之间专一性键结之特性,对检体进行检测;由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之 抗原 或 抗体 仍可具有免疫活性,因此设计其键结机制后,配合酵素呈色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用呈色之深浅进行定量分析。 历...
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