（一）质粒DNA的提取及鉴定 1． （1）将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中，接入一单菌落，于37℃剧烈振荡培养过夜。 （2）将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中，用台式离心机于4℃以12000g离心5min，将剩余的培养物贮存于4℃。 （3）吸尽培养液，使细菌沉淀尽可能干燥。 2．碱裂解法小量抽提质粒 （1）将细菌沉淀...
（一）DNA的酶切与连接 （1）酶切反应 同质粒DNA的鉴定，只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切，则成比例增加。 （2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。 （3）15000rpm离心15min，弃上清。 （4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃上清，真空抽干。 （5）加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
鲜姜提取物的制备方法包括将鲜姜榨汁，在每千克鲜姜汁中加入固体试剂10～80克，组成以鲜姜汁为液相、以固体试剂为固相的液－固萃取体系，在10～80℃对鲜姜汁进行萃取2～20小时，沉淀，分离沉淀物，干燥，即可获得具有鲜姜天然活性和天然风味的鲜姜提取物（挥发油和姜辣素混合物）。所用固相试剂是淀粉，糊精，纤维素等。该方法工艺和设备简单，同时完成鲜姜复杂活性成分的提取...
ＡＢＯ血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无Ａ抗原或／和Ｂ抗原，将血型分为Ａ型、Ｂ型、ＡＢ型及Ｏ型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正（血清试验）反（细胞试验）定型准确鉴定ＡＢＯ血型。 所谓正定型是用已知抗Ａ和抗Ｂ分型血清来测定红细胞上有无相应的Ａ抗原或／和Ｂ抗原，所谓反定型是用已知Ａ细胞和Ｂ细胞来测定血清中有无相应的抗Ａ或抗Ｂ。
一、DNA探针的应用
显微鉴定是简捷可靠的中药品种鉴定手段之一，该方法可解决肉眼直观不能解决的问题。花类药材商品由于经过采制、干燥、包装、贮藏等多道工序，常皱缩破碎，改变了原来的形状和颜色，和完全而新鲜的花比较不易区别。显微鉴定可以弥补性状鉴定的不足，特别是一些破碎严重或已经粉碎的花类药材，显微鉴定成为不可缺少的手段。 一朵完全的花类药材，包括花梗、花托、花萼、花瓣、雄蕊、雌蕊等...
...近年来国内外已将HLA分型技术由 抗原 水平发展到 基因 水平。 （一）限制性片段长度 多态性 检测技术 这是首先建立的对多态性进行检测的 DNA 分析技术。个体间抗原特异性来自 氨基酸 顺序的差别，后者由编码基因的 碱基顺序 不同所决定。这种碱基顺序的差别造成 限制性内切酶 识位置及 酶切位点 数目的不同，从而产生数量和长度不一的DNA酶切片段。用特异性 ...
...am和Gilbert（1977年）提出的化学降解法，其中双脱氧链终止法是目前应用最多，最好的技术。 一、Sanger双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物，4种dNTP（dATP、dGTP、dTTP和dCTP）。聚合酶用模板作指导，不断地将dNTP加到引物的3'-OH末端，使引物延伸，合成...
质粒 （plasmid）是 细菌 或 细胞 染色质 以外的，能自主复制的，与细菌或细胞 共生 的遗传成分。其特点如下： ①是染色质外的双链共价闭合环形 DNA （covalentlyclosed circuar DNA,cccDNA），可自然形成 超螺旋结构 ，不同质粒大小在2-300kb之间，＜15kb的小质粒比较容易分离 纯化 ，＞15kb的大质粒则不易...
DNA 分子 是4种 脱氧核苷 酸经3’→5’ 磷酸二酯 健聚合而成，所以了称为 多核苷酸 （polynucleotide）。DNA的 一级结构 是指4种 核苷酸 的连接及其排列顺序。1953年Watson和Cricd提出了DNA分子双 螺旋结构 模型，其要点是：DNA分子是由2条平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手双螺旋结构（B型DNA）。多种芏酸的方...
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