...制备第一抗体以外的其它动物血清(非免疫的)。有明显溶血的血清不能用,以免产生非特异性染色。免疫荧光染色时,可用0.01%伊文氏兰(PBS溶液)稀释荧光抗体,对消除背景的非特异性荧光染色有很好的效果。当然使用特异性高、效价高的第一抗体是最重要的...
...洗涤,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。 间接荧光免疫法:阴性。 阳性:重症肌无力、类风湿性...
...1.直接检查组织内免疫复合物法用抗补体C3等荧光抗体直接作用组织切片,与其中结合在抗原抗体复合物上的补体反应,而形成抗原抗体补体复合物---抗补体荧光抗体复合物,在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物的存在处,此法常用于肾穿刺组织...
...效价最佳时,收集抗血清。(2)系列稀释第一抗体法:在一定稀释度时,抗体的特异性结合最强;继续增加抗体的稀释度,特异性反应将随之减弱至消失。因此采用系列稀释第一抗体的方法,能够验证抗血清的特异性。2.抗体的选择 原则上应选择在较高稀释度时染色...
...减弱及标记与未标记抗体间竞争干扰,从而提高敏感性和特异性。Steruberger等采用抗酶抗体法(PAP)检测钩端螺旋体,发现其录敏度较荧光抗体法比高100~1000倍。Petrali等也发现了PAP法比抗体搭桥法灵敏5~20倍。...
...,并已列入某些疾病的常规检查项目。用免疫荧光技术间接法检查病人血清中对自身某种成分的抗体,其突出的优点是抗体和相应组织成分结合后,通过观察发现明亮荧光的组织成分的形态特征而直接查出相应自身抗体,对于自身抗体的定性和定位同时进行,这种准确简便...
...阿拉明等,以备急需。(二)操作步骤:在暗室中进行。先在兰色光波下观察眼底检查部位的情况,注意有无假荧光,为了观察病人对荧光素有无过敏反应,先取10%荧光素钠0.5ml加入无菌等渗盐水4.5ml稀释,作为预测试验,缓慢地注入肘前静脉,询问病人...
...荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)是一种间接荧光抗体法。试验前先用Reiter密螺旋体超声波裂解物处理病人血清,除去其中具有交叉反应的抗体后,再与梅毒螺旋体作用,然后加用荧光素标记的抗人IgG。此法敏感性高、特异性强,能最早检测出...
...抗肾小球基底膜抗体是由肾小球毛细血管内外透明层及中间致密层构成的网状结构,以糖蛋白为主体。 检测GBM抗体的最常用方法是以肾脏组织为抗原的IIF法(间接免疫荧光法),其荧光特点是在肾小球基底膜处显示典型的花瓣状、或斑点状、颗粒状着染。...
...1.检查抗原法 这是最早的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应抗原结合,在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差(图3-2)。图...
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