...组织中的靶DNA或RNA进行杂交,然后该寡核苷酸探针充当引物的作用,在Kelow多聚合酶的催化作用下,将生物素(或地高辛、荧光素)标记的核苷酸编入,以达到原位显示的目的。PRINS技术具有3个方面的优点:首先由于探针在杂交时是未标记的,仅在...
...digoxigenin –11-dUTP(图20-3)。通过随机引物或缺口翻译法(多用随机引物法),将dig-11-dUTP与探针的核酸分子相连,构成Dig-配基标记的核酸探针。将这种标记的探针与组织、细胞或染色体原位核酸分子之间的同源序列在...
...包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应(PCR)检测。18只猫中有15只UAT阳性,用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌,培养基中加猫血或羊血比用...
...包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应(PCR)检测。18只猫中有15只UAT阳性,用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌,培养基中加猫血或羊血比用...
...聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)用于Hp研究创造了条件。本文就近年有关PCR在Hp研究中的应用作一综述。1 PCR原理PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术,有关它的原理许多文献已有详细...
...自1988年以来On等科学家相继在研究对导致人类免疫缺陷的HIV-1/AIDS病毒DNA进行细胞内定位,以期提高对患者的阳性检出率。在系列研究的基础上,Bagasra及其同事在1990~1993年成功的报告了原位杂交及聚合酶链反应结合法,...
...引物来自真核DNA,其与真核序列的退火率要高于原核序列。因此,对于克隆的DAN探针,常先将插入探针DNA切下来回收后再标记,而缺口平移法可直接用于全质粒的标记。5.聚合酶链反应(详见第二十二章) 聚合酶链反应(polymerase ...
...在温和的条件下,TNBS将核酸的胞嘧啶转化为N-甲氧基-5,6-二氢嘧啶-6-磺酸盐衍生物,对胞嘧啶残基进行磺化修饰制成磺化半抗原探针。此法十分简便,也可用于蛋白质的标记。标记方法:取变性单链的DNA5μg,溶于0.02mol/L硼酸钠...
...梅毒的核酸探针 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 分子杂交法:阴性 阳性:梅毒感染。...
...RNA之间的碱基配对原由,A=U,T=A,C=G,合成与模板DNA序列互补的RNA链。④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。⑤需要Mg2+或Mn2+离子。⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性,所以没有校正功能。图17-2 ...
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